[发明专利]一种基于ZDF大鼠的糖尿病合并冠心病动物模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物模型技术领域，尤其涉及一种基于ZDF大鼠的糖 尿病合并冠心病动物模型的建立方法。

背景技术

糖尿病改变了多种细胞的功能，包括血管的内皮细胞、平滑肌细 胞及血小板细胞，这些均可导致冠状动脉硬化、血管内斑块形成。并 且，糖尿病伴有冠心病患者的冠状动脉病变更加严重，表现在病变 的范围更广范，常为多支血管受累，每支血管弥漫性多处受累；冠状 动脉多为严重狭窄，并且患糖尿病的时间越长，狭窄程度更高。虽然 糖尿病伴有冠心病患者的冠脉病变严重，但是糖尿病患者由于经常合 并神经病变，疼痛的感觉减弱，所以常常没有典型的冠心病心绞痛表 现，而更多见无症状的心肌缺血、没有征兆的心肌梗死，甚至猝死， 对生命造成巨大的威胁。因此，糖尿病患者应该警惕在不知不觉中 发生并进展的冠心病，做到早期预防、早期诊断、合理治疗。

ZDF大鼠是常用的2型DM模型动物，该鼠由于瘦素受体突变导致 多食、肥胖同时伴有高胰岛素血症、高脂血症和中度高血压。雄性ZDF 大鼠一般于8～10周出现DM，有DM的典型症状如多饮、多尿和体重 增加缓慢，并可出现神经病变。雄性ZDF大鼠肌肉GLUT4表达明显降 低，其胰岛β细胞GLUT2表达也明显下调，这可能是ZDF大鼠发生2 型糖尿病的机制。组织学研究发现，6周龄大鼠胰岛即表现有结构紊 乱和纤维化、胰岛β细胞脱颗粒现象，同时胰岛β细胞数量远低于相同 周龄的非糖尿病症状ZDF大鼠。

目前构建糖尿病合并冠心病大鼠模型周期长、成功率低。

发明内容

本发明提供了一种基于ZDF大鼠的糖尿病合并冠心病动物模型 的建立方法。

本发明采用如下技术方案：

本发明的基于ZDF大鼠的糖尿病合并冠心病动物模型的建立方 法的具体步骤如下：

将患糖尿病的ZDF雄性大鼠适应性喂养2周后，每天皮下注射 盐酸异丙肾上腺素注射液，注射量为1mg·kg^-1，连续10天。

ZDF大鼠是常用的2型DM模型动物，该鼠由于瘦素受体突变 导致多食、肥胖同时伴有高胰岛素血症、高脂血症和中度高血压。雄 性ZDF大鼠一般于8～10周出现DM，有DM的典型症状如多饮、 多尿和体重增加缓慢，并可出现神经病变。

本方法采用以下步骤构建糖尿病冠心病动物模型：

①大鼠分组。大鼠包括糖尿病症状和非糖尿病症状大鼠。非糖 尿病大鼠作为空白对照组(n＝6)和正常对照组，糖尿病症状 大鼠分为两组，分别为模型组1、模型组2。

②适应性喂养。非糖尿病大鼠(空白对照组和正常对照组)采 用普通饲料喂养，糖尿病症状ZDF组(模型组1和模型组2) 采用高脂饲料喂养，2周后开始给药。喂养饲料不变。

③给药。采用皮下注射方式给药糖尿病症状ZDF大鼠。空白对 照组和模型组1注射生理盐水，正常对照组和模型组2注射盐 酸异丙肾上腺素ISO。每天上午给药，给药剂量1mg·kg^-1，连 续给药5-10天。

④模型评价。采样点取样：血清、心脏组织(切片形态)。检测 血清肌酸激酶(CK)，肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性，观察组 织形态变化，评价模型。

本发明的积极效果如下：

本发明的糖尿病合并冠心病动物模型的建立方法基于ZDF大鼠， 采用连续给药和高脂饲养相结合构建糖尿病合并冠心病动物模型，周 期短、成模率高。

附图说明

图1是大鼠血清CK活性的变化图；

组一：空白；组二：正常；组三：模型1；组四：模型2。

图2是大鼠血清CK-MB活性的变化图；

组一：空白；组二：正常；组三：模型1；组四：模型2。

图3是心肌组织切片形态图；

A.空白对照B.连续注射5天ISO模型鼠C.连续注射10天ISO 模型鼠。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实施例1

1.材料和方法

1.1主要试剂、材料与仪器