[发明专利]表达乳铁蛋白转基因鸡及其实现方法

权利要求书

1.一种表达乳铁蛋白转基因鸡，其特征在于是通过构建表达乳铁蛋白的慢病毒载体， 再把这种慢病毒载体通过受精种蛋鸡胚盘注射后孵化或种公鸡睾丸注射后取精子人工受精 生出的蛋进行孵化，获得的表达乳铁蛋白的转基因鸡。

2.根据权利要求1所述转基因鸡，其特征在于所述鸡胚盘注射获得表达乳铁蛋白的转 基因鸡步骤为：1)受精种蛋初消毒、大头朝上放置；2)再消毒后顶端打小孔，剥开鸡蛋内 膜，看见浮在蛋清上面的鸡胚；3)用注射器向鸡胚注入慢病毒载体；4)封口后，放入孵化 箱孵化，孵出的小鸡部分带有表达乳铁蛋白的转基因鸡。

3.根据权利要求1所述转基因鸡，其特征在于所述睾丸注射获得表达乳铁蛋白的转基 因鸡是临注射前，将慢病毒浓缩液加入Polybrene至最终浓度3ug/ml混均待用；取4-15周 龄公鸡进行全身麻醉，按体重肌肉注射公鸡，麻醉后，右侧肋骨处开切口，暴露两侧睾丸， 分别随机点上述混均的注射病毒浓缩液，每侧睾丸注射4-5点，缝合创口，注射破伤风一次 及青、链霉素一周，以防感染；

公鸡饲养一个月后，取鸡精液在荧光显微镜下进行观察，如果发现带有荧光的精子，用 这种精子进行人工受精，生出的蛋进行孵化，孵出的小鸡部分带有表达乳铁蛋白的转基因鸡。

4.用于实现权利要求1所述表达乳铁蛋白转基因鸡的方法，其特征在于构建表达乳铁 蛋白的慢病毒载体，把这种慢病毒载体通过受精种蛋鸡胚盘注射后孵化或种公鸡睾丸注射后 取精子人工受精生出的蛋进行孵化，获得表达乳铁蛋白的转基因鸡。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于所述鸡胚盘注射获得表达乳铁蛋白的转基因 鸡步骤为：1)受精种蛋初消毒、大头朝上放置；2)再消毒后顶端打小孔，剥开鸡蛋内膜， 看见浮在蛋清上面的鸡胚；3)用注射器向鸡胚注入慢病毒载体；4)封口后，放入孵化箱孵 化，孵出的小鸡部分带有表达乳铁蛋白的转基因鸡。

6.根据权利要求4所述方法，其特征在于所述睾丸注射获得表达乳铁蛋白的转基因鸡 是临注射前，将慢病毒浓缩液加入Polybrene至最终浓度3ug/ml混均待用；取4-15周龄公 鸡进行全身麻醉，按体重肌肉注射公鸡，麻醉后，右侧肋骨处开切口，暴露两侧睾丸，分别 随机点上述混均的注射病毒浓缩液，每侧睾丸注射4-5点，缝合创口，注射破伤风一次及青、 链霉素一周，以防感染；

公鸡饲养一个月后，取鸡精液在荧光显微镜下进行观察，如果发现带有荧光的精子，用 这种精子进行人工受精，生出的蛋进行孵化，孵出的小鸡部分带有表达乳铁蛋白的转基因鸡。