[发明专利]多西紫杉醇维瑞肽偶合物及其制备方法

权利要求书

1.一种多西紫杉醇维瑞肽偶合物，其特征在于：所述的多西紫杉醇在2’位羟基通过链接序列与维瑞肽的氨基相连。

2.根据权利要求1所述的多西紫杉醇维瑞肽偶合物，其特征在于：所述连接剂为HOOC-(CH₂)_nCOOH；

其中，n=2-12。

3.根据权利要求2所述的一种多西紫杉醇-维瑞肽偶合物，其特征在于：所述偶合物的制备方法为：先合成中间体DTX-Linker，再与连接在固相合成树脂上的维瑞肽相连，合成DTX-1-维瑞肽偶合物、DTX-5-维瑞肽偶合物、(DTX)₂-维瑞肽偶合物，最后再将合成的目标产物从树脂上解离下来，最终得到纯净的目标产物多西紫杉醇维瑞肽偶合物。

4.根据权利要求3所述的中间体DTX-Linker，其特征在于：其制备方法为：

1）将多西紫杉醇溶于无水二氯甲烷，加入4-二甲基氨基吡啶（DMAP），丁二酸酐，在一定条件下反应一段时间后加入乙酸乙酯，并用盐酸调pH值至3-4，依次用水萃取3次、饱和食盐水萃取1次，最后用无水硫酸钠干燥，过滤后减压回收乙酸乙酯；

2）所得残余物用丙酮-乙醚重结晶，得中间体DTX-Linker；

进一步，所述的无水二氯甲烷溶剂与4-二甲基氨基吡啶（DMAP）的体积比范围为（11:1）-（15:1），其中无水二氯甲烷与DMAP的最佳体积比是12:1。

5.根据权利要求3所述的DTX-1-维瑞肽偶合物，其特征在于：其制备方法为：

1）向侧链氨基受保护的维瑞肽树脂中加入特定的脱除剂，选择性脱除N-端Fmoc氨基保护基，得到Lys⁵-侧链氨基受保护、N端侧链氨基酸游离的维瑞肽树脂，并将其置于固相合成反应器中，用无水二氯甲烷浸洗后抽取溶剂并通入干燥氮气；

2）将多西紫杉醇-2’-丁二酸酯（DTX-Linker）溶于无水二氯甲烷，并加入特定的高效偶合试剂，低速搅拌一段时间后，滴入上述通有氮气的固相合成反应器中，在一定条件下反应一段时间；

3）将反应物减压浓缩，除去溶剂后，依次用二甲基甲酰胺洗涤6次，用二氯甲烷洗涤5次，用乙醚、石油醚、环己烷、正己烷中的一种或任意比例的混合溶剂洗涤3次，将洗涤后的反应物抽干即得到DTX-Linker-NH-维瑞肽-固相合成树脂；

4）目标产物从固相合成树脂上解离的步骤为：将干燥的树脂加入一定的溶剂中，搅拌1小时后过滤；

5）目标产物分纯化的步骤如下：过滤物用无水二氯甲烷洗涤过滤，滤液合并后减压抽干，残余物用溶剂萃取，抽滤收集溶剂不溶的固体，干燥后得到纯净的目标产物DTX-1-维瑞肽偶合物；

进一步，所述操作方法中，其特征在于：所述的反应步骤1）中的特定脱除剂为吡啶的N,N-二甲基甲酰溶液，其中吡啶的质量分数为15%-35%，以20%为最佳；

进一步，所述操作方法中，其特征在于：所述的步骤2）中溶解DTX-Linker的二氯甲烷可用无水二氯乙烷替换，其中无水二氯乙烷与无水二氯甲烷的替换摩尔比为：（1:1）-（3:1）；所述的步骤2）中特定的高效偶合试剂为HOCt（1-羟基-1H-1,2,3-三唑-4-羧酸乙酯）、DMC（碳酸二甲酯）、DIC（N,N-二异丙基碳二亚胺）、DIEA（N,N-二异丙基乙胺）按一定比例混合的混合溶剂，其中V_DMC:V_HOCt=（5:1）-（10:1），V_DIC:V_DIEA=（3:1）-（8:1）；

进一步，所述操作方法中，其特征在于：所述步骤2）中反应条件如下：反应温度为：（20-35）℃，搅拌速度为：（200-800）r/min，搅拌时间为：（5-30）min，其中最佳反应条件为：反应温度为25℃，搅拌速度为540r/min，搅拌时间为10min；

进一步，所述操作方法中，其特征在于：所述步骤4）中解离溶剂为2%-10%三氟乙酸的二氯甲烷溶液，其中最佳质量比为5%；所述步骤4）中解离反应条件为：反应温度为：（20-25）℃，搅拌速度为：（300-800）r/min，搅拌时间为：（0.8-1.5）h，其中最佳反应条件为：反应温度23℃，搅拌速度为：450r/min，搅拌时间为：1.0h。