[发明专利]一种用于胶质母细胞瘤病情进展检测的标志物

说明书

本发明公开了一种用于胶质母细胞瘤病情进展检测的标志物。所述标志物为采用实时定量PCR的扩增产物，扩增引物为针对RIP2基因序列的特异性引物，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明的标志物能够检测RIP2表达水平与胶质母细胞瘤病情进展之间的相关性，并且采用实时定量PCR的方法，能够精确，快速检测RIP2基因的表达水平。

技术领域

本发明涉及一种判断胶质瘤疾病进展的标志物，特别涉及一种用于胶质母细胞瘤病情进展检测的标志物。

背景技术

胶质瘤是成人中心神经系统发病率最高和致命的脑肿瘤。按病理和临床特点可分为I至IV极,其中多形性胶质母细胞瘤(GBM)是脑胶质瘤中恶性程度最高的的亚型。近年来尽管在多重治疗方面已取得了一些进展,但脑胶质瘤病人总的预后并没有明显改善，GBM病人的平均生存时间仍然不超过14个月。

15年前，NFκB与胶质瘤的相关性已被证实。胶质瘤细胞暴露促炎性刺激或通过上游调节子主要细胞因子刺激条件下，NFκB途径持续激活或上调。此外，NFκB激活已被报道与胶质瘤的恶性愈后相关。许多NFκB靶基因，包括细胞因子，细胞周期调节子，抗凋亡蛋白和细胞黏附分子已被发现影响胶质瘤细胞的侵袭能力和化疗耐药。目前胶质瘤发生、发展机制尚不明确。最近研究发现NFκB途径在胶质瘤引发细胞经历分化过程中是被激活的，并且阻断NFκB激活促进了分化细胞的衰老,因此阻断NF-кB信号通路被认为是抑制GBM激活状态的治疗靶标。

受体相互作用蛋白2(Receptor-Interacting protein 2，RIP2)具有丝/苏氨酸蛋白激酶活性，属于RIP家族成员。RIP2在其N末端含有一个信号转导途径中关键的丝/苏氨酸激酶结构域，该结构域可调控自身磷酸化，稳定RIP2的表达。随后连接的是中间结构域，位于中间结构域的293-319氨基酸与NF-кB必须调节子(NF-кB essential modulator，NEMO)具有相互作用，在RIP2介导的NF-κB活化中起到重要作用。研究显示，RIP2在人组织中表达广泛，并且对其在多种细胞株中的表达分析发现，RIP2在胶质瘤细胞株U87MG和U251细胞中呈现高表达，提示RIP2可能对胶质瘤细胞生存起到重要作用。同时发明人对临床28例星型胶质细胞瘤组织样本的检测结果显示RIP2在星型胶质细胞瘤组织样本中呈现过表达，并且其表达水平与肿瘤恶性程度密切相关。此外，在细胞水平发明人通过RNAi干涉实验证实RIP2在胶质瘤细胞中作为正调控子参与经典和非经典NF-κB通路激活。因此RIP2对经典和非经典NF-κB通路的正调控作用可能是引起胶质瘤病情进展的重要分子机制之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于胶质母细胞瘤病情进展检测的标志物。

一种用于胶质母细胞瘤病情进展检测的标志物，所述标志物为采用实时定量PCR的扩增产物，扩增引物为针对RIP2基因序列的特异性引物。

所述标志物的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。

所述针对RIP2基因序列的特异性引物为：引物f1，其核苷酸序列如序列表中SEQID No.2所示；引物r1，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.3所示。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明通过标志物检测RIP2表达水平与胶质母细胞瘤病情进展之间的相关性，按临床分期分组结果显示,II期、III期、IV期胶质瘤患者RIP2基因表达水平均显著高于正常对照组,Ⅲ期、IV期胶质瘤组RIP2基因的表达水平显著高于Ⅱ期组,具有显著性差异。表明RIP2mRNA表达水平与疾病进展之间的密切程度高,呈显著正相关性。本发明采用实时定量PCR的方法能够精确、快速检测RIP2基因的表达水平。

附图说明

图1是real time q-PCR扩增组织样本RIP2的溶解曲线。

图2是real time q-PCR扩增组织样本GAPDH的溶解曲线。