[发明专利]一种抗人HER2抗体及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了一种抗人HER2抗体，其重链可变区的三个高变区CDRH1、CDRH2、CDRH3的氨基酸序列分别为：GSFSGYYWS、EINHSGSTNYNPSLKS、MGINSGGYLYGMDV；其轻链可变区的三个高变区CDRL1、CDRL2、CDRL3的氨基酸序列分别为GLSSGSVSTSYYPS、TTNIRSS、MLYMGSGIWV。本发明还提供了一种抗人HER2抗体的编码基因以及包含该编码基因的重组载体和表达系统。本发明的抗HER2抗体是能用于检测表达HER2的细胞，也可以用于治疗人体疾病；全人源抗HER2抗体，亲和力高，能特异结合HER2，有效预防和治疗肿瘤疾病。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种抗人HER2抗体及其编码基因和应用。

背景技术

人表皮生长因子受体ErbB/HER蛋白家族是受体络氨酸激酶(Receptor TyrosineKinase,简称RTK)中的一组。它们对细胞的生长、分化和生存起着非常重要的作用。该组包括四个成员：人表皮生长因子受体EGFR(又称ErbB1或HER1)、HER2(又称ErbB2或c-neu)、HER3(又称ErbB3)和HER4(又称ErbB4或tyro2)。

由erbB1基因编码的EGFR在表达水平变异的情况下与肿瘤发生相关联。在乳腺癌、膀胱癌、肺癌、胃癌、头颈癌等肿瘤中，EGFR均有较高的表达水平。研究发现，这些肿瘤细胞EGFR的高表达又与同类肿瘤细胞所产生的EGFR配体(ligand)和TGF-α的高表达。这种自分泌的信号又刺激EGFR传导通路使得肿瘤细胞进一步生长。多种抗EGFR或其配体的单克隆抗体对此类肿瘤有一定的疗效。

ErbB/HER蛋白家族的第二个成员是HER2。该蛋白首先发现与大鼠的成神经细胞瘤(neuroblastoma)，是大鼠原癌基因(proto-oncogen)neu基因的产物。后来发现人的neu基因产物在乳腺癌和卵巢癌中有很高的表达，而且预后效果甚差。随后，研究人员发现HER2的高表达常常与该基因的扩增有关。HER2高表达与其他肿瘤也有关，如：胃癌、肺癌、肾癌、肠癌、胰腺癌、膀胱癌等等。

Hudziak等获得多个鼠源的抗HER2抗体，并用人乳腺癌细胞系SK-BR3进行了研究。结果发现，抗HER2单克隆抗体4D5具有很强的抑制人乳腺癌细胞系SK-BR3细胞生长的特性。该单克隆抗体还能使HER2高表达的乳腺肿瘤细胞增加对TNF-α细胞毒性的敏感性。

除了EGFR和HER2外，科技人员在进一步研究后又发现了二个HER受体家族的成员，即HER3和HER4。这二个受体在乳腺癌细胞系中也有高表达。

上述HER受体家族的成员常以不同的组合在细胞中出现。不同的组合可以增加对多种HER配体的结合，以此增加细胞的多样性。例如，EGFR有六种配体：EGF、TGF-α、HB-EGF、amphiregulin、betacellulin和epiregulin等。EGF和TGF-α虽然不直接与HER2结合，但EGF可以刺激EGFR与HER2形成异性二聚体，进一步激活EGFR使异性二聚体的HER2得到反式磷酸化。二聚体内的HER2在被磷酸化后得到激活。

鼠源的抗HER2抗体4D5经过人源化处理后的抗体rhuMAb HER2(又称huMAb4D5-8，或曲妥珠单抗Trastuzumab，商品名“赫赛汀”HERCEPTIN.RTM.；美国专利号US5821337)在临床上有活性，对一部分HER2高表达的乳腺癌病人在临床上取得治疗效果，同时也发现对许多同样是HER2高表达的乳腺癌病人没有临床效果。

因此，开发了另一个人源化后的鼠源单克隆抗体rhuMab 2C4(又称Pertuzumab)可以抑制HER2与其他HER受体成员的结合形成异性二聚体，进而抑制由配体引起的磷酸化及下游RAS和AKT通路的激活。在Pertuzumab的临床试验和临床应用中对一部分病人产生一定效果，而对多数HER2高表达的乳腺癌病人同样没有临床效果。