[发明专利]一种BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括T315I突变检测反应液，且所述T315I突变检测反应液包括10×PCR缓冲液、脱氧核糖核苷三磷酸、用于扩增靶多核苷酸的上游引物以及下游引物和用于检测靶多核苷酸的探针；

所述用于检测靶多核苷酸的探针的碱基对序列为：

5’FAM-TTCATGACCTACGGGAACCTCCTGGA-BHQ13’。

2.根据权利要求1所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述用于扩增靶多核苷酸的上游引物以及下游引物的碱基对序列为：

上游引物：5’-GAGCCCCCGTTCTATATCATGAT-3’；

下游引物：5’-AGCACCACGGCGTTCACC-3’。

3.根据权利要求2所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括内标，所述内标为BCR-ABL融合基因中ABL基因4号外显子，且所述内标的序列为：

5’-GCCGAGTTGGTTCATCATCATTCAACGGTGGCCGACGGGCTCATCACCACGCTCCATTATCCAGCCCCAAAGCGCAACAAGCCCACTGTCTATGGTGTGTCCCCCAACTACGACAAGTGG-3’。

4.根据权利要求3所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述T315I突变检测反应液还包括用于检测内标的探针，所述检测内标的探针的碱基对序列为：

5’HEX-CACGCTCCATTATCCAGCCCCAAA-BHQ13’。

5.根据权利要求4所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述T315I突变检测反应液还包括用于扩增内标的上游引物以及下游引物；所述上游引物以及下游引物的碱基对序列为：

上游引物：5’-GCCGAGTTGGTTCATCATCATT-3’；

下游引物：5’-ATAGACAGTGGGCTTGTTGCG-3’。

6.根据权利要求5所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述10×PCR缓冲液包括pH值为7.5的200mmol/L的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液、浓度为30mmol/L的氯化镁溶液、浓度为500mmol/L的氯化钾溶液、体积比为0.2％的曲拉通溶液和体积比为10％的甲酰胺溶液。

7.根据权利要求5所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述脱氧核糖核苷三磷酸为dATP、dCTP、dGTP、dUTP或dTTP。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括酶混合液，所述酶混合液包括1U/μl～5U/μl的耐热DNA聚合酶和0.05U/μl～0.2U/μl尿嘧啶DNA糖基化酶。

9.根据权利要求8所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括阳性对照，所述阳性对照为包含内标目的序列片段的质粒和BCR-ABL融合基因T315I突变位点所在区域片段质粒的混合物。

10.根据权利要求8所述的BCR-ABL融合基因T315I突变荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括阴性对照，所述阴性对照为灭菌水稀释的内标目的序列片段的质粒。