[发明专利]一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖及应用

说明书

技术领域

本发明属于食品技术领域，涉及一种多糖及其制备方法，尤其是一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖及应用，该硫酸酯化灰树花水不溶性多糖能够增强免疫力。

背景技术

灰树花(Grifolafrondosa)，又叫贝叶多孔菌、千佛菌等，原产于日本的东北部、北美等地，是一种珍贵的药食两用菌。由于灰树花培育方法简单且产量大，因此在全球范围内广泛分布，在全球应用最重要的菌类中，灰树花的产量位居第二位。

灰树花提取物D-fraction拥有明显的抗肿瘤功能，此项成果于1987年在国际药物化学杂志《化学与药物公报》上首先报道；1992年，在难波弘障等几位日本科学家的研究下指出灰树花多糖可以抵御艾滋病毒；经过美国宾夕法尼亚大学化学系研究人员多年的研究发现，灰树花中的抗氧化物质-麦硫因作为细胞保护剂可以预防强致癌物引起的肿瘤和基因突变；2009年，美国AlbertHecks教授最新的研究成果显示，他们成功地从日本舞茸样品中提取出一种具有识别基因错误作用的生物酶，这种酶能够有效抑制肿瘤生成。

硫酸酯化多糖(SulfatedPolysaccharides，SPS)，也称多糖硫酸酯(PolysaccharideSulfate，PSS)，是指糖基上含有硫酸基团的多糖，其来源主要分为二类：一是从动物、植物、微生物中直接提取的多糖硫酸酯，如有天然抗凝剂之称的肝素以及酸性粘多糖类的硫酸软骨素。近年来，从藻类中提取的天然褐藻多糖硫酸酯显示出了较好的抗氧化活性；来源于海藻的角叉菜胶作为天然多糖硫酸酯，具有卓越的抗HIV活性。

多糖的功能和活性取决于其平面及空间结构和其理化性质。硫酸基团的引入而产生的聚阴离子特性是多糖硫酸酯化后具有的新特性，这种特性有利于提高多糖的溶解性，糖链的屈伸性也得到了改善。硫酸基团之间以及硫酸基团与糖链间的的静电排斥和空间位阻，致使糖环构象发生转变和扭曲，改变了多糖的结构，进一步促使多糖获得新的生物活性。部分多糖经硫酸酯化后增加了其生物活性，一些改性前不具备的活性在改性后表现显著。还有一些多糖经硫酸酯化后，其原有活性得到增强，具备更好的活性与功效。硫酸酯化多糖具有免疫调节、抗凝血、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性。

作为自然界含量最丰富的生物大分子之一，多糖与人类生活密切相关。灰树花多糖作为多糖家族中的重要一员，因其广泛的来源、便捷的使用、较高的安全系数、显著的生物活性，已获得国内外人士的广泛认可。人们对于灰树花子实体多糖的研究多将重点放在灰树花水溶性多糖，而较少被关注的水不溶多糖占据了灰树花子实体多糖的较大比例，其提取方法也较不成熟，同时其应用方面也较窄。而且，对多糖进行硫酸酯化修饰需选择适宜的酯化剂，再经一定的溶剂系统作为多糖的酯化环境，在一定的反应条件下，多糖的部分羟基即可被硫酸基团取代，现有的氯磺酸-吡啶法酯化剂合成繁琐，反应过程中有腐蚀性气体产生，不宜大规模生产；三氧化硫吡啶法生产的产物粘稠、不易搅拌,反应进行迟缓，产物得率低且性状不均一。

本发明研究了灰树花子实体中提取的水不溶多糖的硫酸酯化方法与条件，获得的硫酸酯化多糖具备良好的水溶性和显著的免疫调节活性，使灰树花水不溶多糖得到了充分的利用。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖及应用，该硫酸酯化灰树花水不溶性多糖能够增强免疫力，其能够应用在药物或保健品中。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖，制备方法的步骤如下：

⑴以灰树花多糖为原料，将灰树花多糖用N,N-二甲基甲酰胺溶胀，所述灰树花多糖与N,N-二甲基甲酰胺的比例mg：mL为200-300：1-5mL，然后加入[(CH₃)₃N·SO₃]，所述灰树花多糖与[(CH₃)₃N·SO₃]的质量比为400-600：1-4，水浴50-90℃搅拌反应5-7h，得反应产物；

⑵将反应产物冷却至室温，3000-5000r/min离心弃上清，沉淀加入无水乙醇后3000-5000r/min离心8-15min，用乙醇离心洗涤多糖3次，直到[(CH₃)₃N·SO₃]的鱼腥味消除，得多糖沉淀物；