[发明专利]一种固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法

权利要求书

1.一种固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：该方法的步骤包括：

1).将黑曲霉菌种接种于PDA斜面上进行活化培养，得到纯种的黑曲霉斜面菌种；

2).采用配制好的液体培养基培养纯种黑曲霉菌种获得液态黑曲霉种子液；

3).利用过滤筛筛取合适粒径的麸皮作为固态培养基，并进行含水量调配，调配完成后放入发酵罐进行消毒；

4).利用蠕动泵将培养好的液态黑曲霉种子液均匀的接种到发酵罐中进行扩大培养；

5).黑曲霉种子培养过程中通入无菌空气，调节夹套水温以及调节发酵罐转速来保证供氧量与生长温度。

2.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤1)中，黑曲霉斜面菌种的活化培养温度为35～37℃，培养时间是5～7天。

3.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤2)中的液体培养基的制备方法为：取10-20wt％玉米淀粉，0.2-1wt％豆粕粉装入烧杯中，加入蒸馏水，并加入0.2-1wt％高温淀粉酶，放到石棉网上加热，并不断搅拌至溶液由乳白色变白色透明淀粉水解后，停止加热，待烧杯冷却后，补水至1000ml。

4.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤2)中，接种完纯种黑曲霉菌种的液体培养基放置于恒温摇床中进行培养，培养温度为33-37℃，培养时间为20-28h，转速为160-200r/h，得到液体黑曲霉接种子液。

5.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤3)中用60-80目的筛子筛取麸皮，取筛上麸皮，灭菌结束后培养基湿含量在50％。

6.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤4)中，发酵罐在实验前进行蒸汽消毒，用蒸汽锅炉生产121℃的过热蒸汽，通过蒸汽管路进入罐内进行杀菌消毒，消毒时间为60min，将灭菌后的黑曲霉菌种培养基放入空消完成后的发酵罐中，通入121℃的过热蒸汽，持续灭菌60min，在灭菌过程中保持发酵罐转动，夹套水温度设置为100℃。

7.根据权利要求1所述的固态发酵法规模化制取黑曲霉孢子的方法，其特征在于：所述步骤5)中发酵罐控制包括如下步骤：

(1)通过PLC调节发酵罐夹套水流量从而控制发酵罐的换热，保证发酵罐内温度在33～37℃范围内；

(2)每隔一个小时转动一次发酵罐，转速3r/min，时间为5～10min，当物料温度达到35℃时停止转动；

(3)在整个发酵过程中，无菌空气均先进入空气增湿系统再进入发酵罐内，时刻补充物料水分；

(4)在黑曲霉的第2—4天的对数生长期以及稳定生长前期，单独为物料补水，以补充物料在发酵过程中消耗的水分。