[发明专利]一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于食品检验技术领域，具体涉及一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法。

背景技术

食品添加剂靛蓝在食品生产加工中作为食品着色剂被广泛使用，产品中非色素有机物的含量是该产品的重要质量指标，其含量多少直接体现了靛蓝产品的品质优劣，因此，国际上许多国家及组织均对靛蓝中非色素有机物的含量进行了严格的限制，其中，国际食品法典委员会(FAO/WHO，1992)规定食品添加剂靛蓝中靛红-5-磺酸、5磺基邻氨基苯甲酸、邻氨基苯甲酸总量不超过0.5％；美国食品化学品法典(FCCV)中规定靛红-5-磺酸不超过0.4％，5-磺基邻氨基苯甲酸不超过0.2％。

但遗憾的是我国食品添加剂靛蓝的国家安全标准尚未将非色素有机物限量指标列入。食品添加剂中非色素有机物的检测方法主要为柱色谱法、纸色谱法和薄层色谱法以及液相色谱法，但前三种方法因操作繁琐，影响因素多，测定精密度较差，实际检测工作中很难被广泛采用；尚未检索到国内用液相色谱法测定食品添加剂靛蓝中非色素有机物的报道，国外液相色谱相关测定方法提取简单且无净化步骤，色素及可溶性有机物随目标检测物同时进入色谱系统，造成了色谱图干扰严重、洗脱驻留在色谱柱上色素及有机物时间过长、色谱柱及检测器寿命缩短等缺陷。为了弥补上述方法弊端与缺陷，经过研究与试验，制定了一种专门针对食品添加剂靛蓝中非色素有机物的提取、净化、浓缩以及高效液相色谱测定分析方法。

发明内容

本发明的目的在于公开了一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，包括以下步骤：

(1)、靛蓝试样溶液的提取：用浓度为2.5％的氨水溶液溶解靛蓝试样并提取三种非色素有机物；

(2)、靛蓝试样溶液的净化和浓缩：用离子交换硅胶基SPE柱净化、浓缩三种非色素有机物；

(3)、靛蓝试样溶液测定：对净化和浓缩后的试样溶液用高效液相色谱仪进行测定，得到靛蓝试样中各成分的色谱图，记录色谱峰面积，并通过与标准品的标准峰面积进行比较来测定含量；高效液相色谱仪的色谱条件为：

a、色谱柱选自柱长250mm，内径4.6mm，填料5μm的AgilentZORBAXSB-C18柱；或性能相当的色谱柱；

b、保护柱选自柱长15mm，内径4.6mm，填料5μm的AgilentZORBAXSB-C18柱；或性能相当的色谱柱；

c、柱温：30℃；

d、流动相：A泵为0.05mol/L醋酸铵溶液，B泵为甲醇；

e、检测波长：245nm；

f、进样体积：10μL。

上述技术方案所述的一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，其中，步骤(1)的具体过程为：准确称取适量靛蓝试样，放入小烧杯中，用浓度为2.5％的氨水溶液溶解后，全部移入100mL容量瓶中，并用浓度为2.5％的氨水溶液定容至刻度，摇匀，备用。

上述技术方案所述的一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，其中，准确称取靛蓝试样0.5g，精确至0.001g。本技术方案中0.5g通常指0.5g左右，精确至0.001g通常指单次称量要精确到小数点后第三位。

上述技术方案所述的一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，其中，步骤(2)的具体过程为：依次用甲醇5mL、水5mL活化SPE柱，准确吸取步骤(1)获得的试样溶液10.0mL过此小柱；再依次用浓度为2.5％的氨水溶液5mL和甲醇5mL淋洗，吹干小柱后，用浓度为6％甲酸甲醇溶液1.0mL洗脱，洗脱液过0.22μm滤膜后，供步骤(3)测定。

上述技术方案所述的一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，其中，步骤(3)中高效液相色谱仪的梯度洗脱程序为：

上述技术方案所述的一种食品添加剂靛蓝中非色素有机物的测定方法，其中，靛蓝试样中非色素有机物的含量测定按式(一)计算。