[发明专利]一种Fe3O4@CA-β-CD纳米微球的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球的制备方法及其应用。

背景技术

四氧化三铁纳米粒是一种容易合成并且表面功能化的纳米磁性材料，具有良好的生物相容性、生物降解性、低毒等优点，广泛应用于生物医学工程等领域，如基因转染、细胞及蛋白分离、磁共振成像、药物靶向传递系统；被美国FDA批准用于磁共振造影剂和靶向药物传递载体。目前制备四氧化三铁纳米粒的方法很多，比较典型的有水相共沉淀法、热分解法、水热/溶剂热法、微乳液法等。由于四氧化三铁纳米粒表面积较大，容易发生团聚，因此需要在四氧化三铁表面包裹一层无机或有机壳层，形成核-壳结构从而提高其稳定性。壳层材料需要满足以下几个条件：①良好的化学稳定性；②良好的生物降解性；③良好的生物相容性和血液相容性；④无毒或低毒；⑤能有效抑制四氧化三铁纳米粒的团聚；⑥易于制备并控制其厚度。本文选用柠檬酸作为壳层材料，通过控制反应条件使柠檬酸包覆在四氧化三铁纳米粒表面，达到抑制团聚的目的。

现有的磁靶向药物传递系统存在一些问题，如载药率低、药物释放存在明显突释现象等。β-环糊精作为一种常用的包合材料，是由7个D-葡萄糖分子以1,4-糖苷键连接的环状低聚糖化合物，具有能容纳疏水性药物的空穴结构，其自身毒性很低，适用于提高疏水性药物的水溶性或者延缓药物释放，是一种比较理想的制剂辅料。

发明内容

本发明的目的是提供一种Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球的制备方法，本发明的另一目的是提供目Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球包载多柔比星的应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球的制备方法，步骤如下：

（1）表面修饰柠檬酸的四氧化三铁纳米微粒Fe₃O₄CA的制备；以FeCl₃·6H₂O、FeSO₄·7H₂O为铁源，以柠檬酸为稳定剂，采用超声辅助共沉淀法合成了柠檬酸修饰的四氧化三铁Fe₃O₄CA纳米微粒；

（2）Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球的制备：将Fe₃O₄CA纳米微粒加入蒸馏水中，然后加入β-环糊精，搅拌均匀，干燥、洗涤、用强磁铁分离得到Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球。

所述步骤（1）中Fe³⁺与Fe²⁺的摩尔比为2∶1，柠檬酸的用量以质量计是铁源用量的50-100%，反应时间15min，共沉淀法制备时的陈化时间为30min，陈化温度90℃。

所述步骤（2）中β-环糊精的用量以质量计是Fe₃O₄CA纳米微粒的0.8-2.6倍。

所述步骤（2）中1gFe₃O₄CA纳米微粒需要蒸馏水1~2mL。

所述步骤（2）中的干燥是在105~115℃的真空干燥箱中干燥2.5~3.5h。

所述步骤（2）中干燥后的样品用无水乙醇和去氧蒸馏水洗3~5遍。

所述的四氧化三铁纳米微球的制备方法制备得到的四氧化三铁纳米微球包载多柔比星的应用。

将Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球置于去氧蒸馏水中进行超声分散，然后加入多柔比星用超声细胞破碎仪超声处理，然后离心分离、洗涤、干燥得到装载多柔比星的四氧化三铁纳米微球Fe₃O₄β-CD-DOX，于2~8℃密封保存。

超声分散时1gFe₃O₄CA-β-CD纳米微球需要去氧蒸馏水2~3mL，所述多柔比星的质量是Fe₃O₄CA-β-CD纳米微球质量的2~2.5倍。

利用超声细胞破碎仪进行超声处理时的超声频率70kHz，超声功率为300W，超声时间10~90min。