[发明专利]一种利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法

权利要求书

1.一种利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)液体培养基的制备

①先采集新鲜的空心莲子草茎叶，冲洗干净，阴干去除茎叶表面的水分，剪碎成1～ 2cm的碎片，取200g，加适量的水，煮沸后，继续煎煮22～28min，经两层纱布过滤，得 空心莲子草煎液；②添加葡萄糖20g，加水定容至1000mL；③分装至500mL三角瓶，每 瓶300mL，在0.1MPa压力下灭菌24～26min；

(2)链格孢菌培养

在灭菌后的液体培养基中转接3块直径为0.8～1.2cm的链格孢菌饼于液体培养基中； 培养温度为25±1℃，光照为L/D＝12:12，摇床振荡培养，转速为110rpm/min，培养时间 为5～7d；

(3)链格孢菌毒素的制备

将培养后菌液经减压抽滤得滤液，滤液经大孔吸附树脂吸附，然后用体积浓度为90％ 的洗脱剂洗脱得洗脱液，并浓缩得棕色浸膏；浸膏经柱层析分离得活性毒素；

(4)链格孢菌毒素的应用

将分离的活性毒素加入水中进行配制，配制成浓度为125～2000μg/mL的混合液，并 加入助剂，混合均匀后，喷洒在空心莲子草上，在3天内使空心莲子草表现出明显的毒害 症状，并杀死共生杂草。

2.根据权利要求1所述的利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，其特征在于， 所述步骤(3)中的洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇中的一种或两种混合物。

3.根据权利要求1所述的利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，其特征在于， 所述步骤(4)中的助剂为表面活性剂、植物源助剂、增效剂和渗透剂的混合物，提高链 格孢菌毒素对空心莲子草3～5倍的植物毒性。

4.根据权利要求3所述的利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，其特征在于， 所述助剂为十二烷基苯磺酸钠、曲拉通X-100、硝酸铵、有机硅、司班-60、农乳HSH437、 农乳0201B、农乳1602、农乳8205中的多种混合物。