[发明专利]一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺在审

专利信息
申请号: 201510899082.2 申请日: 2015-12-09
公开(公告)号: CN105420303A 公开(公告)日: 2016-03-23
发明(设计)人: 储消和;吴黎诚;程跃;生英涛;徐顺清;陈万河 申请(专利权)人: 浙江绿创生物科技有限公司
主分类号: C12P13/24 分类号: C12P13/24;C12R1/19
代理公司: 湖州金卫知识产权代理事务所(普通合伙) 33232 代理人: 裴金华
地址: 313200 浙江省湖*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 生产 反式 羟基 脯氨酸 发酵 工艺
【权利要求书】:

1.一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:采用pH为1-6的除菌亚铁离子溶液,在发酵过程中以流加方式加入发酵罐,保持发酵罐内稳定的亚铁离子浓度;所述发酵以葡萄糖为碳源。

2.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:亚铁离子总浓度为0.35-3.5mmol/L,在规定时间内匀速流加。

3.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述的规定时间为在48小时内。

4.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁离子溶液采用膜过滤除菌或者高温灭菌。

5.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁离子溶液中还加有抗氧化剂或还原剂。

6.根据权利要求5所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:发酵过程中,所述抗氧化剂或还原剂的浓度为0.35-3.5mmol/L。

7.根据权利要求5所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述抗氧剂或还原剂为抗坏血酸。

8.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁盐为七水硫酸亚铁。

9.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述发酵采用的菌种为保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2015年9月17日,保藏编号为CCTCCM2015550的大肠杆菌HJ(EscherichiacoliHJ)。

10.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:活化培养工程菌大肠杆菌HJ(EscherichiacoliHJ),并将培养好的种子逐级放大,并在发酵罐中进行好气培养,培养温度33-37℃,控制pH为6.5-7.0,溶氧20%以上,发酵时间40-60小时;配置无菌亚铁离子溶液,并在发酵过程中流加亚铁离子溶液;在发酵后期取样检测羟脯氨酸含量,至含量不再增加为止。

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