[发明专利]一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺在审
申请号: | 201510899082.2 | 申请日: | 2015-12-09 |
公开(公告)号: | CN105420303A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
发明(设计)人: | 储消和;吴黎诚;程跃;生英涛;徐顺清;陈万河 | 申请(专利权)人: | 浙江绿创生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/24 | 分类号: | C12P13/24;C12R1/19 |
代理公司: | 湖州金卫知识产权代理事务所(普通合伙) 33232 | 代理人: | 裴金华 |
地址: | 313200 浙江省湖*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 反式 羟基 脯氨酸 发酵 工艺 | ||
1.一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:采用pH为1-6的除菌亚铁离子溶液,在发酵过程中以流加方式加入发酵罐,保持发酵罐内稳定的亚铁离子浓度;所述发酵以葡萄糖为碳源。
2.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:亚铁离子总浓度为0.35-3.5mmol/L,在规定时间内匀速流加。
3.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述的规定时间为在48小时内。
4.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁离子溶液采用膜过滤除菌或者高温灭菌。
5.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁离子溶液中还加有抗氧化剂或还原剂。
6.根据权利要求5所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:发酵过程中,所述抗氧化剂或还原剂的浓度为0.35-3.5mmol/L。
7.根据权利要求5所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述抗氧剂或还原剂为抗坏血酸。
8.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述亚铁盐为七水硫酸亚铁。
9.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:所述发酵采用的菌种为保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2015年9月17日,保藏编号为CCTCCM2015550的大肠杆菌HJ(EscherichiacoliHJ)。
10.根据权利要求1所述的一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的发酵工艺,其特征在于:活化培养工程菌大肠杆菌HJ(EscherichiacoliHJ),并将培养好的种子逐级放大,并在发酵罐中进行好气培养,培养温度33-37℃,控制pH为6.5-7.0,溶氧20%以上,发酵时间40-60小时;配置无菌亚铁离子溶液,并在发酵过程中流加亚铁离子溶液;在发酵后期取样检测羟脯氨酸含量,至含量不再增加为止。
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