[发明专利]基于指纹图谱的微损鉴别刺猬紫檀种属的方法

权利要求书

1.一种基于指纹图谱的微损鉴别刺猬紫檀种属的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）、刺猬紫檀种属指纹图谱的建立：

（1.1）、样品的预处理：

用直径为1.5-3.0mm 的钻头钻取深度为5-10mm的刺猬紫檀种属木屑样品0.05-0.2g于提取瓶中，加入提取溶剂3-8mL，超声提取5-10min，得提取液，再经有机相微孔滤膜过滤置于样品瓶中，得到待上机预处理样品，其中所述提取溶剂为乙酸乙酯：甲醇=10:1-8:1的混合物；

（1.2）、指纹图谱的获取：

将上述预处理样品进行气相色谱-质谱联用仪检测,得到以总离子流色谱图特征峰的保留时间、质谱图和峰面积作为定性参数组成的GC-MS 3D指纹图谱；气相色谱-质谱联用仪参数设置为：毛细管色谱柱是DB-5MS:30m×0.25mm×0.25μm；进样量是0.5-1μL，进样口温度是230-250℃；柱温初始温度是50-70℃保持2min，然后以4-6℃/min升至280℃保持4-6min；质谱接口温度是250-270℃；质谱扫描模式是全扫描，质量扫描范围是35amu-350amu；进样方式是脉冲不分流；载气是浓度≥99.999%的氦气，流量是1.0-1.5mL/min；离子化方式是EI，离子化电压是70eV；离子源温度是230℃，四级杆温度是150℃；

(1.3)、确定刺猬紫檀种属的标准GC-MS 3D指纹图谱特征峰：

确定多批刺猬紫檀种属标准样品，按上述（1.1）（1.2）步骤得到提取物总离子流色谱图共有特征峰的保留时间、质谱图和峰面积，整理得出用作标准的刺猬紫檀提取物GC-MS 3D指纹图谱特征峰及其化学物质信息表；

（2）、刺猬紫檀木真伪鉴别判定方法：

将按步骤（1.1）（1.2）获得的刺猬紫檀种属待检样品的GC-MS 3D指纹图谱中特征峰的保留时间、质谱图和峰面积的数据与标准GC-MS 3D指纹图谱中的特征峰对照，通过核对两特征峰保留时间、质谱图和峰面积的一致性或相似性来判定刺猬紫檀种属样品的真伪；

其中保留时间D1的一致性允许偏差±0.5min，质谱图D2的一致性是匹配率大于90%，允许出现五个检出的化学物质匹配率小于90%，峰面积D3的一致性是最多允许五个检出的化学物质峰面积低于检出限，必不可少的成分是第18个特征峰的成分茴香偶姻，且百分比含量最高。

2.根据权利要求1所述的基于指纹图谱的刺猬紫檀种属微损鉴别的方法，其特征在于上述成分茴香偶姻的百分比含量要大于70%。

3.根据权利要求1所述的基于指纹图谱的刺猬紫檀种属微损鉴别的方法，其特征在于上述保留时间的一致性是参考安捷伦数据处理系统来判断的，保留时间允许偏差±0.5min，超出允许偏差列为可疑特征峰。

4.根据权利要求3所述的基于指纹图谱的微损鉴别刺猬紫檀种属的方法，其特征在于上述保留时间的一致性偏差应小于0.2min，避免色谱峰漂移影响分析结果。

5.根据权利要求1所述的基于指纹图谱的微损鉴别刺猬紫檀种属的方法，其特征在于上述质谱图的一致性可参考收入安捷伦数据处理系统的谱库的刺猬紫檀提取物GC-MS 3D指纹图谱特征峰的质谱图，并结合上述刺猬紫檀种属的标准GC-MS 3D指纹图谱特征峰，以保证样品检出的化学物质质谱图得到合理解释的匹配率大于90%，保证样品检出的化学物质质谱图检索的一致性。

6.根据权利要求1所述的基于指纹图谱的微损鉴别刺猬紫檀种属的方法，其特征在于上述峰面积的响应值是待测质量离子峰高除以1/2平均噪声高度，确定样品检出的化学物质的检出限，保证样品检出的化学物质峰面积响应值的检出限和准确性。