[发明专利]一种神经酸的提取分离方法

权利要求书

1.一种神经酸提取分离方法，其特征在于：包括下述步骤：

（1）提取

（1.1）取神经酸含量大于0.5%的神经酸原料，进行粉碎；

（1.2）将经步骤（1.1）处理所得的原料过筛，筛的目数为5-20目，将过筛后的原料用生石灰拌匀，所述生石灰的质量是原料质量的0.05-0.1倍；

（1.3）将经步骤（1.2）处理所得的原料用5-10倍原料重量的有机溶剂进行提取；

（2）浓缩

合并步骤（1.3）的提取液，减压浓缩至除去有机溶剂，得到浓缩液；

（3）调酸

向浓缩液中加入酸液进行调节，使浓缩液的pH=8-9；

（4）萃取

（4.1）将经步骤（3）处理所得的浓缩液用有机溶剂萃取，得到萃取液；萃取次数为1-3次，萃取溶剂的体积为步骤（3）处理所得的浓缩液体积的1-8倍；

（4.2）将萃取液浓缩至比重为1.00-1.20，该比重是在60℃，常压下测得，得到萃取浓缩液，加萃取浓缩液0.2-0.3倍体积量的丙酮进行溶解，得到溶解样；

（5）常压柱层析

（5.1）装柱及上样

（5.1.1）采用湿法填充常压柱，填料填满柱体后不留死体积；

（5.1.2）将经步骤（4.2）处理所得的溶解样泵入常压柱；

（5.1.3）将有机溶剂泵入柱除去极性小的杂质；所述有机溶剂是正己烷、乙酸乙酯、氯仿、丙酮或乙醇任一或者任意两种以任意比例混合；

（5.2）洗脱

（5.2.1）对经步骤（5.1.3）处理所得的常压柱进行洗脱；

（5.2.2）采用高效气相色谱仪跟踪洗脱部分，分段收集含有神经酸的洗脱液和其他有效成分的洗脱液；

（5.3）常压柱重复使用的再生、平衡

对经步骤（5.2.1）处理所得的常压柱进行再生、平衡；用碱性甲醇进行再生，平衡是用步骤（5.1.3）中所用的有机溶剂进行平衡；

（5.4） 浓缩

将经步骤（5.2.2）处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10-1/100，5-20℃的环境中放置结晶10-30h，将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶；

（5.5） 重结晶

向经步骤（5.4） 处理所得粗结晶中加入有机溶剂进行溶解，所用有机溶剂重量为粗结晶重量的0.1-10倍；溶解完成后，放置至5-20℃的环境中，结晶10-20h；依次离心，过滤，干燥，即可得到含量为95%以上的神经酸；

所述步骤（1.1），原料是中国元宝枫籽、荆条籽或蒜头果；

所述步骤（1.3）是用正己烷提取，提取温度为40-50℃，提取3次，每次提取2小时；

所述步骤（3）调酸，加入的酸液是稀盐酸、稀硫酸、饱和柠檬酸或冰醋酸；

所述步骤（4.1）中有机溶剂是氯仿、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯或醋酸甲酯任一或者两种以任意比例混合；

所述步骤（5.1.1）填充的填料是200-300目的粗孔硅胶或中性氧化铝，所述硅胶的质量为步骤（4.2）收集的萃取浓缩液质量的1-2倍；

所述步骤（5.1.3）所述有机溶剂的质量为步骤（4.2）收集的萃取浓缩液质量的３-5倍；

所述步骤（5.2.1）中洗脱体系是正己烷、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇或乙醇任意两种混合，混合比例为1：1-100：1；通过该洗脱体系的洗脱，能有效分离芥酸，山嵛酸其他杂质成分；

所述步骤（5.5）重结晶中有机溶剂是氯仿、乙酸乙酯、丙酮或乙醇。

2.如权利要求1所述的一种神经酸提取分离方法，其特征在于：包括下述步骤：

（1）提取

（1.1）取神经酸含量为5%的蒜头果原料100kg进行粉碎；

（1.2）将经步骤（1.1）处理所得的原料过10目筛，再用0.1倍原料质量的生石灰拌匀；

（1.3）将经步骤（1.2）处理所得的原料用10倍原料重量的正己烷的提取，提取温度为45℃，提取3次，每次提取2小时，得到提取液；

（2）浓缩

将提取液合并，减压浓缩至无正己烷，得到浓缩液；

（3）调酸

向浓缩液中加入冰醋酸，使浓缩液的pH=8；

（4）萃取

（4.1）将经步骤（3）处理所得的浓缩液用氯仿萃取，得到萃取液；萃取次数为3次，萃取溶剂的体积为步骤（3）处理所得浓缩液体积的3倍；

（4.2）将萃取液浓缩至比重为1.09，该比重是在60℃，常压下测定，加萃取浓缩液0.2倍体积量的丙酮溶解，得到溶解样；

（5）常压柱层析

（5.1）装柱及上样

（5.1.1）采用湿法填充常压柱，常压柱层析所用填料为200~300目粗孔硅胶，填料填满后密封，不留死体积；

（5.1.2）将经步骤（4.2）处理所得的溶解样泵入常压柱；

（5.1.3）泵入2500ml的正己烷除去极性小的杂质；

（5.2）洗脱

（5.2.1）对经步骤（5.1.3）处理所得的进行洗脱；洗脱体系为正己烷和氯仿混合溶剂；

（5.2.2）GC跟踪洗脱部分，分段收集洗脱液中有效成分；当洗脱体系中正己烷和氯仿比例为9：1，收集到芥酸；正己烷和氯仿比例为5：1，收集到山嵛酸；正己烷和氯仿比例为3：1，收集到神经酸；

（5.3）常压柱再生、平衡

对经步骤（5.2.1）处理完的常压柱用碱性甲醇进行再生，用正己烷平衡；

（5.4）浓缩

将经步骤（5.2.2）处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10，放置15℃的环境中结晶20h；将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶；

（5.5）重结晶

向经步骤（5.4） 处理所得粗结晶加入丙酮溶液进行热溶，丙酮溶液的重量为粗结晶重量的0.8倍；待溶解完后，放置在15℃的环境中结晶12h；依次离心、过滤、干燥，即可得到4kg含量为95.80%的神经酸，收率为4.0%。