[发明专利]一种提高硫酸软骨素钠纯度的方法

说明书

技术领域

本法说明涉及一种提取提纯制备原料药的方法，属于酶工程领域，具体是一种提高硫酸软骨素钠纯度的方法。

背景技术

硫酸软骨素钠是由猪软骨中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质，在动物体内多以硫酸软骨素钠-蛋白质复合物的形式存在。医学上，硫酸软骨素钠在体内能促进基质中纤维的增长，增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢，对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，改善眼部干燥症状。通过促进基质的生成，为细胞的迁移提供构架，有利于角膜上皮细胞的迁移，从而促进角膜创伤的愈合，渗出液的吸收及炎症的消除。

目前是，国内大所属厂家采用物理搅拌或者化学物质溶解粗品硫酸软骨素钠。物理方法，溶解速度太慢，且溶解的不够均匀，分子排布杂乱，杂质较多；化学方法，相对来说，速度较快，但是采用化学试剂会破坏分子活性，且容易产生副产物，不以去除，产品纯度较低。本工艺采用了酶解法，方法温和，具有较好的生产效益，纯度可以提高到90%。

发明内容

本发明提供了一种酶解法快递溶解粗品硫酸软骨素钠的方法。

本发明的技术方案为：一种制备高纯度硫酸软骨素钠的工艺，其步骤如下：

（1）将粗品硫酸软骨素钠溶入饮用水中，搅拌5-10小时，将其全部溶解；

（2）将步骤（1）中溶解液，用盐酸溶液调PH至7.0-8.0，然后升温至50-55℃之间时加入5-15g/亿单位胃蛋白酶，再加入5-25g/亿单位胰酶，保温2-4小时；

（3）将步骤（1）中酶解液在30～40分钟内升温至85-90℃，静止10-30分钟，搅拌，然后等降温至50-55℃时，用1-3mol/L氢氧化钠溶液调PH至10.0-12.0，静止20-30小时，分层，过滤，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液；

（4）待步骤（3）中上清液和离心液用弱碱性离子交换树脂吸附，用0.3-0.4g/L的氯化钠洗脱，连续洗脱两遍;

（5）取步骤（4）中洗脱液，用2-6mol/L氢氧化钠溶液调PH至10.0-12.0，然后加入3-5%双氧水，氧化10-12小时；

（6）将步骤（5）中溶液用70-75%乙醇沉淀，再加入20-30g/L氯化钠溶液，静止沉淀10-12小时，取沉淀物，用70-75%乙醇溶解，静置24-30小时，弃去上层液；将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通抽干；

（7）将步骤（6）中产品放在真空干燥箱中，烘干70-80小时，得产品。

有益效果：

本发明用酶解法溶解粗品硫酸软骨素钠最后得到效价高于180U/mg，90%纯度的硫酸软骨素钠，达到中国药典标准。

具体实施方式

实施例1

(1)将50g粗品硫酸软骨素钠溶入饮用水中，搅拌7小时，将其全部溶解；

(2)将溶解液用盐酸溶液调PH至6.0，然后升温至53℃之间时加入5g/亿单位胃蛋白酶，再加入5g/亿单位胰酶，保温3小时；

(3)将酶解液在36分钟内升温至87℃，静止20分钟，搅拌，然后等降温至53℃时，用2mol/L氢氧化钠溶液调PH至11.0，静止26小时，分层，过滤，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液；

(4)待上清液和离心液用弱碱性离子交换树脂吸附，用0.36g/L的氯化钠洗脱，连续洗脱两遍;

(5)取洗脱液用4mol/L氢氧化钠溶液调PH至11.0，然后加入4%双氧水，氧化11小时；

(6)将溶液用73%乙醇沉淀，再加入26g/L氯化钠溶液，静止沉淀11小时，取沉淀物，用73%乙醇溶解，静置27小时，弃去上层液，将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通抽干；

(7)将产品放在真空干燥箱中，烘干75小时，得产品。得到的产品经检测其效价为201U/mg,纯度83.2%，硫酸软骨素为0.005mg/mL硫酸皮肤素为0.006mg/mL，各项指标均均符合中国药典要求。

实施例2

(1)将50g粗品硫酸软骨素钠溶入饮用水中，搅拌7小时，将其全部溶解；

(2)将溶解液用盐酸溶液调PH至6.0，然后升温至53℃之间时加入13g/亿单位胃蛋白酶，再加入16g/亿单位胰酶，保温3小时；