[发明专利]激光活体肿瘤细胞或其它病理细胞检测装置及检测方法

说明书

本发明公开了一种激光活体肿瘤细胞或其它病理细胞检测装置及检测方法，装置包括激光光源、激光反射镜、柱透镜、荧光反射镜、光电倍增管、数据处理系统，所述光电倍增管与数据处理系统相连，还包括显微镜和用于固定活体的载物台，所述激光光源、激光反射镜、柱透镜、显微镜形成将激光聚焦到载物台上活体的血管上的聚焦系统，所述荧光反射镜和光电倍增管形成收集血管中靶细胞发出荧光的收集系统。激光光源聚焦成条状，打在活体的一根血管上；当该血管中有荧光分子标记的靶细胞通过激光聚焦的血管时，靶细胞产生的荧光通过荧光反射镜反射被光电倍增管收集，而后通过数据处理系统对检测到信号进行处理。可对活体循环细胞进行检测，检测准确度高。

技术领域

本发明涉及细胞检测技术领域，尤其是涉及一种激光活体肿瘤细胞或其它病理细胞检测装置及检测方法。

背景技术

世界卫生组织不久前在总部法国里昂发表了《2014年世界癌症报告》。据该报告显示，全球癌症负担目前正在以迅猛的速度增长，平均每8个死亡病例中就有1人死于癌症，2012年全球有820万人死于癌症，新增癌症病例达到1400万。报告预测，到2025年，全球每年新增患癌病例将增至1900万，到2030年将增至2200万，到2035年将增至2400万，即20年时间将增加近五成。

癌症已经对人类健康造成了极大的威胁，而研究表明大多数的癌症患者死于转移性癌，而非原发性癌，肿瘤的转移是导致癌症病人死亡的主要原因。早在1869年，澳大利亚籍医生Thomas Ashworth首次在癌症患者的血液样品中观察到循环肿瘤细胞。在转移过程中，原发部位的肿瘤细胞脱落，侵袭进入血液或淋巴等循环系统，其中具有高度转移潜能的肿瘤细胞在循环系统中存活下来，成为循环肿瘤细胞。循环肿瘤细胞在循环系统中不断流动，扩散到远端器官滞留或归巢后，形成转移复发。循环肿瘤细胞是肿瘤发生远处转移的必经步骤，因此在外周血中检测到肿瘤细胞预示着可能会发生肿瘤转移。因此，循环肿瘤细胞的检测对于体外早期诊断，化疗药物的快速评估，肿瘤复发的检测等具有重要的意义。

传统的检测循环肿瘤细胞的方法主要有：a.免疫细胞化学；这一检测方法基于抗原抗体结合反应的原理，利用单克隆抗体与特异的肿瘤标记物结合，并通过酶与底物反应显色来判断肿瘤细胞的存在。b.多聚酶链反应；该方法的原理是特异性扩增出肿瘤细胞中因癌基因、抑癌基因突变或染色体重排而产生的DNA异常。c.流式细胞术，血细胞计数器；这些方法具有灵敏度高，特异性强的优点。但是，由于它们都是抽样检测。而且，抽样检测只能获得某个时间点，少部分血量的数据，而研究表明循环肿瘤细胞的释放可能是间歇性的，且循环中的肿瘤细胞经常成群活动，因此单点时间的采样可能产生一定的误差。而且每次分离准备血样很耗时间，对于一些不正常细胞，比如循环肿瘤细胞在循环系统中很罕见，分离少量的血液样品进行分析的话灵敏度非常低，可能根本就检测不到，难以在早期阶段检测到疾病。抽样检测脱离了细胞的生长环境，其检测结果的可信度不高，不能定量、实时、在体对细胞进行计数。

发明内容

针对现有技术不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种激光活体肿瘤细胞或其它病理细胞检测装置及检测方法，其可对活体循环细胞进行检测，检测准确度高。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：

一种激光活体肿瘤细胞或其它病理细胞检测装置，包括激光光源、激光反射镜、柱透镜、荧光反射镜、光电倍增管、数据处理系统，所述光电倍增管与数据处理系统相连，还包括显微镜和用于固定活体的载物台，所述激光光源、激光反射镜、柱透镜、显微镜形成将激光聚焦到载物台上活体的血管上的聚焦系统，所述荧光反射镜和光电倍增管形成收集血管中靶细胞发出荧光的收集系统。

进一步的，所述激光光源的类型可以为固定激光器、或半导体激光器、或气体激光器、或光纤激光器、或染料激光器，发出的激光波长可为488nm、或561nm、或632nm。

所述聚焦系统还包括狭缝，所述狭缝设在柱透镜和显微镜之间。