[发明专利]从马钱子中提取马钱子碱氮氧化物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药提取技术领域，具体涉及一种从马钱子中提取马钱子碱氮氧化物的 方法。

背景技术

马钱子碱氮氧化物是中药马钱子中的一种化合物，结构式如下所示：

现今对马钱子碱氮氧化物的分离提取受传统中药非机械化的操作方式所限制，步骤 繁琐，耗时，耗力，得到的化合物量少且批次间差异大，难以进行临床研究。

另外对于马钱子碱氮氧化物而言，由于植物中含量少，它的应用也很少有人研究， 因此其潜在作用有待开发。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对以上现有技术问题，提供一种从中药马钱子中提 取马钱子碱氮氧化物的方法，该方法采用高效液相色谱进行分离纯化，分离方法稳定， 重复性高，制备量大，操作简单省时。

本发明所采用的技术方案为：

一种从马钱子中提取马钱子碱氮氧化物的方法，该方法包括以下步骤：

(1)以马钱子子实体为原料，磨成粉末状后，用乙醇浸泡或者回流提取，过滤， 所得滤液进行旋转蒸发至干，用甲醇体积分数为50-70％的甲醇-水二元混合溶剂溶解， 得到固含量50-200mg/mL的提取液；

(2)对得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的色谱柱为C18色谱柱，流动相 为二元混合液相，其中A相为水、B相为甲醇；进样量为50-200mL/针；流动相流速为 100-1000mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；洗脱方式为B相浓度25％ 等度洗脱10min、B相浓度35％等度洗脱20min、B相浓度100％等度洗脱10min；根据紫 外吸收光谱收集13.5-15.5min洗脱液，旋转蒸发至干，得到一维液相组分；

(3)用甲醇体积分数为50-70％的甲醇-水二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至 固含量为50-100mg/mL；

(4)进行二维液相色谱分离：采用的色谱柱为C18色谱柱，流动相为二元混合液相， 其中A相为水、B相为甲醇；进样量为500-2000μL/针；流动相流速为10-30mL/min；检 测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；洗脱方式为B相浓度30％等度洗脱20-40min； 根据紫外吸收光谱收集17.5-20min洗脱液，旋转蒸发浓缩至干，得本发明马钱子碱氮氧 化物。

所述步骤(1)中回流提取可重复进行1-3次，每次1-2h。

所述步骤(1)、(3)中甲醇-水二元混合溶剂含0.1％(质量百分比)乙酸。

所述步骤(2)、(4)中二元混合液相的A相含0.1％(质量百分比)乙酸。

所述步骤(2)中C18色谱柱具体为反相C18轴向加压色谱柱(150×250mm，10μm，)，使用时柱温为室温或25-40℃。

所述步骤(4)中C18色谱柱具体为华谱C18色谱柱(20×250mm，5μm，)，使用时柱温为室温或25-40℃。

本发明选用二维高效液相色谱技术从天然产物马钱子子实体中提取马钱子氮氧化 物，通过合理选择色谱柱、溶解液、流动相等，结合对流速、洗脱方式、收集区段等工 艺条件的摸索，使得整个分离纯化方法切实可行，操作简便，制备周期短，仪器自动化 程度高，试剂耗费量小，常温常压下就可进行，制备量大，重复性高，得到的马钱子氮 氧化物纯度可达99％，且提取批次之间一致性高，可操作性好，可控度高，可直接运用 于工业生产，为马钱子碱氮氧化物的潜在作用开发提供来源保障。

附图说明

图1所示的是本发明从马钱子中提取马钱子碱氮氧化物的方法的一维色谱分离图；

图2所示的是本发明从马钱子中提取马钱子碱氮氧化物的方法的二维色谱分离图；

图3所示的是本发明得到的目的产物的HPLC验纯图；

图4所示的是本发明得到的目的产物的H¹NMR核磁图；

图5所示的是本发明得到的目的产物的C¹³NMR核磁图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步具体描述。应该指出，以下具体说明都是例示性 的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有说明，本发明使用的所有科学和技术术 语具有与本发明所属技术领域人员通常理解的相同含义。

1、原料、材料：