[发明专利]噬菌体粘附蛋白

权利要求书

1.噬菌体粘附蛋白，其由SEQ ID NO：2的氨基酸序列构成。

2.核酸分子，其编码根据权利要求1所述的噬菌体粘附蛋白。

3.载体，其编码权利要求1的噬菌体粘附蛋白。

4.宿主细胞，其被权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的载体转化。

5.产生权利要求1的噬菌体粘附蛋白的方法，其包括以下步骤：

(a)识别噬菌体粘附蛋白的噬菌体结合域；

(b)从包含编码步骤(a)的噬菌体粘附蛋白的序列的核酸分子中删除步骤(a)识别的噬菌体结合域；

(c)利用突变使噬菌体粘附蛋白的水解活性失活。

6.权利要求5所述的方法，其中在步骤(a)中，所述噬菌体结合域通过先进行氨基酸比对，再确定所述噬菌体粘附蛋白相比另一种噬菌体粘附蛋白的N-端来识别，

或其中所述噬菌体结合域通过用适于同源性钓取噬菌体结合域的引物扩增编码该噬菌体结合域的核酸序列来识别。

7.权利要求1所述的噬菌体粘附蛋白用于制造用于结合、富集、移除、捕获和检测革兰氏阴性细菌的试剂的用途。

8.检测细菌的方法用于制备用于检测细菌的试剂盒的用途，其包括以下步骤：

(a)使权利要求1所述的噬菌体粘附蛋白与支撑物偶联；

(b)将偶联有所述噬菌体粘附蛋白的支撑物与样品一起温育；以及

(e)检测样品中与所述噬菌体粘附蛋白结合的细菌。

9.根据权利要求8所述的用途，其还包括：

(c)除去样品以及该样品中未结合所述噬菌体粘附蛋白的细菌。

10.根据权利要求8所述的用途，其还包括：

(d)加入透化或破坏细菌膜的物质。

11.检测细菌的方法用于制备用于检测细菌的试剂盒的用途，其包括以下步骤：

(a)使含有细菌细胞或细胞成分的样品与权利要求1的噬菌体粘附蛋白接触；

(b)然后将含有细菌细胞或细胞成分和所述噬菌体粘附蛋白的样品与固体支撑物一起温育；以及

(e)检测样品中与所述噬菌体粘附蛋白结合的细菌。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述步骤(a)为温育含有细菌细胞或细胞成分的样品与权利要求1的噬菌体粘附蛋白1秒～20分钟。

13.根据权利要求11所述的用途，其中所述步骤(b)的温育时间为1～60分钟。

14.根据权利要求11所述的用途，其还包括：

(c)除去样品以及该样品中未结合所述噬菌体粘附蛋白的细菌。

15.根据权利要求11或14所述的用途，其还包括：

(d)加入透化或破坏细菌膜的物质。

16.根据权利要求15所述的用途，其在所述步骤(c)和步骤(d)之间任选从样品中分离结合了细菌细胞或细胞成分的固体支撑物，其中细菌细胞或细胞成分通过所述噬菌体粘附蛋白结合到所述固体支撑物上。

17.权利要求8-16中任一项所述的方法用于制造用于检测在医药、食品工业和分析、牲畜饲养、新鲜水或环境分析中的细菌的试剂的用途。