[发明专利]一种新的短小芽孢杆菌漆酶基因及其表达与应用

权利要求书

1.一种短小芽孢杆菌漆酶基因cotA，其特征在于，所述基因为在核苷酸序列为SEQIDNO.1所示的基因的基础上经碱基的突变而成的高温稳定的漆酶基因，

所述突变是将氨基酸序列的第57位和第120位突变为Thr。

2.权利要求1所述基因编码的蛋白质。

3.含有权利要求1所述基因的转基因细胞系。

4.含有权利要求1所述基因的基因工程菌。

5.含有权利要求1所述基因的表达载体或克隆载体。

6.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，优选重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。

7.一种权利要求6所述生产漆酶的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，选取大肠杆菌冷休克表达载体pColdII，构建重组表达载体pColdII-cotA，以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为宿主进行表达。

8.一种权利要求7所述生产漆酶的重组大肠杆菌生产漆酶的方法，其特征在于，利用IPTG对重组菌产漆酶进行诱导表达；所述诱导表达条件为IPTG诱导终浓度为0.1mM，诱导温度15℃，诱导时间24h，转速160rpm；培养基成分为：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，pH 7.4。

9.权利要求1所述基因在印染废水脱色中的应用。