[发明专利]一种用于绿豆抗豆象基因Br3辅助选择的分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种用于绿豆抗豆象基因Br3辅助选择的分子标记及其应用，本发明所述的分子标记，命名为SYD404，其是以绿豆品种V1128的基因组DNA为模板，通过采用1对SSR引物经PCR扩增后得到，与抗豆象基因Br3的遗传距离为4.0cM。本发明的一种分子标记为绿豆品种V1128的抗豆象育种提供了一条很好的途径，可以将选择提前到绿豆生长苗期进行，既可以免除大量费时费力的抗豆象鉴定工作，又可以对育种材料进行早代选择，并可以对目标基因进行精准的逐代跟踪。

技术领域

本发明涉及一种与抗豆象基因Br3紧密连锁的分子标记及其在绿豆抗豆象育种中的用途，本发明属于作物遗传育种技术领域。

背景技术

豆象是危害绿豆等食用豆类作物的主要仓储害虫。受危害后的食用豆重量降低，营养丧失，质量严重下降。目前，生产上防治豆象危害的方法主要为磷化铝熏蒸法，这不仅增加了食用豆生产的成本，而且容易导致农药残留、造成环境污染、影响食用者身体健康。防治豆象危害最为经济且环保的方法是培育抗豆象食用豆品种。

TC1966和ACC41是以往的研究中利用最多的2份抗豆象野生绿豆资源。研究者或者利用其本身，或者利用它们的杂交或回交后代作为分析材料，进行抗豆象遗传、抗豆象机理、抗豆象分子标记及抗豆象育种等方面的研究。然而这些野生材料往往具有炸荚、蔓生、晚熟、小粒等育种中的不利性状，且较难克服，更为重要的是TC1966的回交后代中可能存在某些对人体健康不利的成分[Miura K,1996，Effects of bruchid-resistant mungbeanmeal on growth and blood-biochemical values in mice.Japan InternationalResearch Center for Agricultural Sciences Journal,3:23-31]，因此对栽培绿豆中抗豆象资源的筛选利用越来越受重视。目前为止，已报道的栽培绿豆抗豆象资源有4份，其中V2709和V1128均来自印度，V2802和V2817分别来自菲律宾和尼日利亚。V2709和V2802对豆象具有中等抗性，V1128和V2817对象豆象具有完全抗性[Talekar N S,1992,Characterization of Callosobruchus chinensis(Coleoptera:Bruchidae)resistancein mungbean.Journal of Economic,85:1150-1153；Somta C,2008,Characterization ofnew sources of mungbean(Vigna radiata(L.)Wilczek)resistance to bruchids,Callosobruchus spp.(Coleoptera:Bruchidae).Journal of Stored ProductsResearch,44:316-321]。Young等(1992)以TC1966和感豆象绿豆的杂交F₂群体为材料利用RFLP标记对抗性基因进行定位，将抗豆象基因(Br)定位在第8连锁群上10cM的区间，两侧标记pA882和pM151距与Br基因的距离为3.6cM和6.5cM。Kaga等(1998)用TC1966构建的回交群体，进一步对Br基因进行定位，将Br定位到了0.7cM的区间内，其中Bng143标记与Br相距仅0.2cM。Miyagi等(2004)最早对抗豆象野生绿豆ACC41的抗性基因进行了研究，找到了2个与抗豆象基因Br1连锁的STS标记：STSbr1和STSbr2。此后梅丽(2007)和赵丹(2011)又相继对ACC41的抗性基因进行研究，将Br1基因到定位到约11cM的区间，其中与右翼SSR标记C220的距离约2.6cM，左翼标记RAPD标记C78约8.4cM。孙蕾等(2008)利用VC1973A和V2709构建的F₂群体对V2709的抗豆象基因Br2进行了初步定位，将Br2基因定位在16.8cM的区间，距其两侧的RAPD标记和STS标记分别为11.0cM和5.8cM。