[发明专利]源自于SAGE1的肿瘤抗原短肽

说明书

技术领域

本发明涉及新发现的源自于肿瘤抗原SAGE1的短肽，该短肽与MHC分子形成的复合物以及所述短肽与复合物的用途。同时，本发明还涉及与上述短肽或复合物结合的分子，以及这些分子的用途。

背景技术

众所周知，在许多病理条件下，如感染、癌症、自身免疫疾病等，都会有一些特定分子的不适宜表达。因此，这些分子就成了病理或异常状态的“标记”。这些分子不但可以作为疾病诊断的标记物，还可用于产生诊断试剂和/或治疗剂。例如，用癌症的标记物来产生特定的抗体。另外，这些分子还可以有效地激发细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的特异性免疫应答，发挥抗肿瘤效能，同时，还可以通过激活的CTL来获得能够与该“标记”结合的T细胞受体(TCR)作为治疗剂。因此，这些分子，在相关疾病的诊断和治疗中发挥着非常重要的作用。

对于肿瘤而言，已有很多文献发表过不同的内源性的肿瘤抗原分子。但这并不是相关疾病真正的靶点，因为引起CTL免疫应答反应的并非完整的肿瘤抗原分子，而是来自于抗原的特异性CTL表位(Epitope)。一般情况下，肿瘤抗原在细胞内通过蛋白水解作用将其加工成为8-16个氨基酸长度的多肽片段，即CTL表位，进而与内质网腔中的主要组织相容性复合体(MHC，人类的MHC通常称为HLA基因或HLA复合体)分子结合形成多肽-MHC复合物(peptide-MHCcomplex,pMHC),并最终将pMHC递呈到细胞表面供CD8⁺T细胞表面的TCR识别。虽然相关的内源性肿瘤抗原分子早已有发表，但我们并不知晓被呈递出的具体多肽片段。因此，无论是作为疫苗还是用于产生相关疾病的诊断试剂或是治疗试剂，鉴定出这些被呈递到细胞表面的8-16个氨基酸长度的多肽片段，即CTL表位，是至关重要的。本领域技术人员致力于发现并确定这些被呈递到靶细胞表面的多肽片段。

这种被递呈的多肽片段的发现与确定是一个复杂的过程，因为多肽被HLA递呈是抗原蛋白的酶解以及多肽片段与HLA的相互作用的共同结果。这说明，完整的肿瘤抗原分子并不能为多肽片段的发现与鉴定提供任何信息。很多文献发表了利用电脑模拟的方法，如公开数据库SYFPEITHI(Rammensee,et al.,Immunogenetics.1999(50):213-219)和BIMAS(Parker,et al.,J.Immunol.1994.152:163)，提供预测算法来鉴定哪个多肽片段可能会被递呈。但这只是一种预测，具有很大的不确定性，因为它并不是真正的胞内处理以及翻译后的修饰过程。肿瘤组织经过处理后，可以利用质谱仪直接鉴定出肿瘤细胞表面被递呈出的多肽片段，虽然这是一个复杂的过程，但这样得到的结果是非常可靠的。同时，质谱仪的灵敏度也足以能够鉴别低浓度的多肽片段以及翻译后的修饰，因此它是发现及确定肿瘤表面多肽片段的理想工具。

研究发现，SAGE1抗原在黑色素瘤、膀胱癌、肝癌、表皮样癌、非小细胞肺癌和鳞状细胞癌等肿瘤组织中均有表达，而在除睾丸外的多数正常组织中不表达(Martelange V1,De Smet C,De Plaen E,Lurquin C,Boon T.Cancer Res.2000；60(14):3848-55；Atanackovic D,etal.,Cancer Biol Ther.2006；5(9):1218-25)。因此，源自于SAGE1抗原的肽，作为上述多种癌症的靶点，不但可以作为上述疾病诊断的标记物，还可用于产生上述疾病的预防试剂和/或治疗剂，如抗体或T细胞受体。本发明利用质谱仪分析并鉴定出了肿瘤细胞表面被呈递的源自于肿瘤抗原SAGE1的新的多肽片段。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种新发现的源自于肿瘤抗原SAGE1的短肽，该短肽与MHC分子形成的复合物以及所述短肽与复合物的用途。

本发明的第一方面，提供了一种肽，所述肽包含：

(ⅰ)氨基酸序列VLSTAPPQL(SEQ ID NO:1)；或

(ⅱ)在SEQ ID NO:1中具有1个、2个或3个氨基酸取代，和/或1个、2个或3个氨基酸插入，和/或1个、2个或3个氨基酸缺失的氨基酸序列；

其中，所述肽能够与MHC分子形成复合物。

在另一优选例中，所述肽由7-25个氨基酸组成。

在另一优选例中，所述肽由8-16个氨基酸组成。

在另一优选例中，所述肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。

本发明的第二方面，提供了一种pMHC复合物，所述复合物包含本发明第一方面所述的肽。