[发明专利]一种从藤茶中制备具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法

说明书

一种从藤茶中制备具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法，本发明的技术方案要点是：一种从藤茶中制备具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法，(1)藤茶水提物制备，将藤茶置于沸水中，浸泡一段时间，纱布过滤，将滤液冷冻干燥，得藤茶水提物；(2)柱层析分离：将步骤(1)所得藤茶提取物用50%的甲醇水溶液溶解，使用上层析柱，先用一定浓度的甲醇水溶液冲去杂质，然后用一定浓度的丙酮水溶液洗脱，并收集洗脱液；(3)膜透析，将步骤(2)所得洗脱溶液真空旋转蒸发去除丙酮，将所得水溶液放入透析袋中，用水透析一定时间，收集袋内的样液，冷冻干燥，得多酚聚合物。本发明的生产工艺简单，成本较低。

技术领域：

本发明涉及多酚聚合物的提取方法，特别是一种从藤茶中制备具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法。

背景技术：

糖尿病是一种以代谢紊乱为特征的疾病，其不能有效地将血液中的葡萄糖运输至细胞。它主要包括先天性的 1 型糖尿病和后天的 2 型，1 型糖尿病在儿童时期就可以被诊断，其体内不分泌胰岛素，2型糖尿病是胰岛素抵抗引起的，主要发现于成人，糖尿病病人中 90%以上属于这种类型。哺乳动物的α-糖苷酶位于小肠绒毛细胞的表面，是一种碳水化合物消化吸收的关键酶，其主要作用是将寡糖或二糖水解为单糖供人体吸收。因此，α-糖苷酶抑制剂能够延缓饮食中碳水化合物的分解产物寡糖或二糖水解为葡萄糖，从而减少人体对葡萄糖的摄入，进而达到抑制餐后血糖升高的效果。目前，α-糖苷酶抑制剂主要通过微生物发酵或人工合成获得，如阿卡波糖(acarbose)和米格列醇(miglitol)已作为糖尿病患者的临床用药。但这些药物都明显存在肠胃胀气、腹泻、腹部不适等副作用。随着“绿色药物”概念的兴起，从天然材料中获得有效、安全的α-糖苷酶抑制剂已成为功能性食品和医药开发的热点。

藤茶，学名为显齿蛇葡萄，为葡萄科蛇葡萄属的一种野生木质落叶藤本植物，属于典型的类茶植物， 俗称山甜茶、白茶、甘露茶、白毛猴、白茶等， 主要分布于我国湖南、湖北、云南、贵州、广东、广西、福建等地。该植物多生长在海拔400到1300m的山地，集中或散生在阳坡或阴地混杂林中或山地沟边。自古以来，壮族和瑶族人民将其幼嫩茎叶制成保健茶，用于治疗感冒发烧，咽喉肿痛等疾病，夏天泡茶数日不馊，有“神茶”之称，颇受消费者喜爱。根据民间长期饮用实践和现代科学研究证实，其具有清热润肺、平肝益血、消炎解毒、降压减脂、消除疲劳等功效，尤其对因烟酒过度、油腻过多、肝火过旺引起的身体不适如咽喉炎、消化功能障碍等症，具有独特功效。此外，对于其抑菌、抗氧化效果均有报道。二氢杨梅素在藤茶中的含量可高达40%，其被认为是藤茶中的主要活性成分。而本申请人发现含有65%二氢杨梅素的藤茶水提物抑制α-葡糖糖苷酶的活性远高于二氢杨梅素单体，表明藤茶中还含有其它抑制α-葡糖糖苷酶活性更高的物质。

发明内容：

本发明的目的是提供一种工艺简单、实用性强的从藤茶中制备具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法。

本发明的技术方案是，一种从藤茶中制备具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的多酚聚合物的方法，其特征在于：(1) 藤茶水提物制备，将藤茶置于沸水中，浸泡一段时间，纱布过滤，将滤液冷冻干燥，得藤茶水提物；(2) 柱层析分离：将步骤(1)所得藤茶提取物用50%的甲醇水溶液溶解，将其导入层析柱，先用一定浓度的甲醇水溶液冲去杂质，然后用一定浓度的丙酮水溶液洗脱，并收集洗脱液；(3) 膜透析，将步骤(2)所得洗脱溶液真空旋转蒸发去除丙酮，将所得水溶液放入透析袋中，用水透析一定时间，收集袋内的样液，冷冻干燥，得多酚聚合物。步骤(1)藤茶和沸水的重量和体积比为1:10至1:50，浸泡时间不低于0.5 h。步骤(2)中层析柱的填料为Sephadex LH-20，冲洗杂质溶液的甲醇浓度不低于50%(v/v)，冲洗液用量不低于5个柱体积。洗脱液的丙酮浓度不低于60%(v/v)，洗脱液用量2-4个柱体积。步骤(3)中透析袋的截留分子量为1000，透析时间不低于24 h，中间换水不少于3次。

本发明的有益效果是：