[发明专利]虎皮兰花蕾愈伤成苗的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属于一种组织培养和植物繁殖领域，特别涉及一种虎皮兰花蕾愈伤成苗的快速繁殖方法。

背景技术

虎皮兰为龙舌兰科虎皮兰属多年生草本植物，味甘微辛，性平，无毒。能清热解毒，活血消肿，肺热咳嗽，疮疡肿毒，跌打损伤，毒蛇咬伤，烫火伤。虎皮兰叶中含大量麻质纤维，可用于造纸和优质纤维品的开发。虎皮兰能净化室内环境，具有吸收室内甲醛，又能增加室内空气中的负氧浓度，具有较高的经济价值。虎皮兰常见的繁殖方式有扦插法，分株法等。繁殖系数低，性状容易消失，影响观赏质量采用花蕾愈伤组织分化培养能有效保留其性状，达到快速繁殖的目的。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种虎皮兰花蕾愈伤成苗的快速繁殖方法，能够快速有效地提高虎皮兰的繁殖速度和质量，实现虎皮兰优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种虎皮兰花蕾愈伤成苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：

步骤一、取虎皮兰的花蕾作外植体置于诱导培养基中培养，得第一愈伤组织；其中，所述诱导培养基包括：MS、0.2-2.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、0.5-2.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、30mg/L的蔗糖和5mg/L的琼脂，调整诱导培养基的pH为5.8；

步骤二、将步骤一得到的第一愈伤组织置于分化培养基中培养，得到丛生芽；其中，所述分化培养基包括：MS、0.5-2.0mg/L的玉米素、0.2-1.0mg/L的吲哚丁酸、30mg/L的蔗糖和5mg/L的琼脂，调整分化培养基的pH为5.8；

步骤三、将步骤二得到的丛生芽置于壮苗培养基中培养，得到植株；其中，所述壮苗培养基包括：MS、0.5-2.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.1-0.5mg/L的萘乙酸、30mg/L的蔗糖和5mg/L的琼脂，调整壮苗培养基的pH为5.8；

步骤四、将步骤二得到的植株置于生根培养基中培养，得到带根植株；其中，所述生根培养基包括：1/2MS、0.1-1.0mg/L的萘乙酸、30mg/L的蔗糖和5mg/L的琼脂，调整生根培养基的pH为5.8。

优选的是，所述步骤一中，将外植体置于诱导培养基之前需经消毒处理，具体为：将外植体用2％的洗洁精水溶液浸泡20分钟，之后用线状自来水冲洗外植体15-20分钟，将冲洗后的外植体置于添加2-3滴吐温-20的0.1％的升汞溶液中浸泡8-10分钟，取出后用无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸去除外植体表面的水分，即得消毒后的外植体；其中，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。

优选的是，所述步骤四之后，还包括：

步骤五：将步骤四得到的带根植株连同培养瓶一起放入25℃的环境中，打开培养瓶盖，向培养瓶内添加自来水，炼苗4-7天，待带根植株的表面角质形成后取出，洗净根部培养基后移栽至沙床中，在沙床中生长一个月后移栽到苗圃。

优选的是，在诱导培养基中培养的培养条件：培养温度为22-26℃，黑暗条件下培养25-35天；

在分化培养基中培养的培养条件：培养温度为22-26℃，光照强度为1500lux，光照时间为8-10小时/天，培养30天；

在壮苗培养基中培养的培养条件：培养温度为22-26℃，光照强度为1500lux，光照时间为8-10小时/天，培养30天；

在生根培养基中培养的培养条件：培养温度为22-26℃，光照强度为1500lux，光照时间为8-10小时/天，天培养30天。

优选的是，所述外植体在消毒后且置于诱导培养基之前还经过了预处理，具体为：

将外植体浸于诱导膏中，并放入微波发生器中反应，在输出功率为450瓦下反应5min，随后在输出功率为350瓦下反应10min；其中，所述诱导膏包括以下重量份的原料混合而成：10-15份香蕉泥、1-5份琼脂、3-6份芒果叶提取物、3-6份千年健提取物和1000份水。

优选的是，带根植株的表面角质形成后在角质表面涂覆厚度为1-3mm的营养剂后再移栽至沙床，所述营养剂包括：0.0035份的麦芽硒、0.2份的藻朊酸、3-5份的竹醋液和100份的水。

优选的是，所述营养剂中还加入有1-2重量份的含有氮、磷、钾的复合肥。

本发明至少包括以下有益效果：

1、利用虎皮兰的花蕾进行愈伤组织分化，有效保留其性状，短时间内培育出大量的种苗，虎皮兰的组培采用花蕾相对于叶片来说，其诱导率更高，而相对于子和肧的组织培养，其优势是不会产生形状分离，保持母株的优良形状。