[发明专利]一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法在审
申请号: | 201510922087.2 | 申请日: | 2015-12-11 |
公开(公告)号: | CN105325302A | 公开(公告)日: | 2016-02-17 |
发明(设计)人: | 邓科君;郑雪莲;张勇 | 申请(专利权)人: | 电子科技大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 611731 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 液体 培养基 白芨 种苗 生产 方法 | ||
本发明属于中药材种植技术领域,特别是一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法。本发明要解决的技术问题是为快速获得白芨幼苗提供一种新方法。该方法括如下步骤:a、灭菌;b、萌发;c、生长成芽;d、生根培养;e、将成苗进行炼苗,移栽。该方法操作简便,成本低廉,每瓶液体培养基可萌发数万粒种子,且种子萌发整齐,出苗一致,污染率低。本发明最终实现了白芨组培苗的高效快速生产,并有效简化操作程序,降低生产成本,便于进行规模化生产。
技术领域
本发明属于中药材种植技术领域,特别是一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法。
背景技术
白芨为兰科白芨属的多年生宿根草本植物,是国家重点保护野生植物。白芨花大色艳,具有较高的观赏价值;同时白芨有肥厚肉质的块状假鳞茎,是重要的中药材之一。
自然野生状态下,成熟的白芨种子呈粉末状,非常细小,在显微镜下多呈纺锤形,长约1.2mm,宽约0.2mm。其种子的结构十分简单,由一层透明的种皮和一个种胚组成。种皮为单层细胞组成,细胞器及原生质均已消失,是一层半透明的死细胞;胚在外形上尚处于未分化状态,为原胚阶段,胚柄退化,无胚乳。开花授粉15周后的种子有胚率仅为59%左右,极少萌发成苗。由于上述原因,白芨种子自然萌发率极低,繁殖困难,加之人们长期掠夺式的采挖导致其野生资源频临枯竭,因此现有的白芨资源无法满足市场的极大需求。
人工繁育是目前提高白芨产量的有力措施,现有的繁育方法大多以分株为主,即将块茎切成小块种植,但繁殖系数低,消耗量大,大面积供种依然较为困难,难以满足大规模生产的需要。
包括白芨在内的兰科植物,通过无菌播种与组织培养的方式,可以在短时间内获得大量的实生苗,不失为一种快速有效的繁殖方法。现有技术主要通过将种子撒播在添加激素的固体培养基上萌发,再生无菌苗,或诱导原球茎、经增殖生根后进行快繁。这些方法大多涉及4-5种以上的培养基,操作较为繁琐,而且周期较长,最短在110天内方能成苗移栽,因此相对生产成本较高。
在白芨的组织快繁技术中,激素的种类及配比十分关键,直接影响着种子的萌发率、原球茎的诱导率以及生长速度。现有方法中用于种子萌发的培养基为添加包括细胞分裂素类6-BA、KT以及生长素类NAA、2,4-D等的固体培养基,萌发率在50%-95%不等,种子萌发周期较长一般在30-45天左右,且种子萌发率受种子种龄影响大,近成熟的种子(一般20周龄后)萌发率高,15-20周龄前的种子萌发率极低或不萌发。TDZ(噻苯隆)是一种新型植物生长调节剂,具有很强的细胞分裂素活性,它的活性要比一般细胞分裂素类高几十倍至几百倍。基于TDZ高效的促细胞分裂活性,在白芨的组培快繁中,有研究者将TDZ用于原球茎的增殖并获得良好效果,却未见将其用于种子萌发的报道。TDZ相对BA等常见激素略贵,用于增殖使用量大,时间长,增加成本。
发明内容
本发明要解决的技术问题是为快速获得白芨幼苗提供一种新方法。
本发明的技术方案是一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法,包括如下步骤:
a、灭菌:将开花授粉15~20周龄的白芨蒴果用自来水流水冲洗30min以上,进行表面灭菌,然后剥开,对种子进行消毒;
b、萌发:消毒后的种子置于MS+0.5~2.0mg/L TDZ+30g/L白砂糖、pH5.8的液体培养基中,23~27℃,90~120rpm黑暗培养5天后,转入光照16h/暗培养8h的光周期下震荡培养15~20天,种子萌发;
c、生长成芽:将已萌发的种子接种于MS+0.1~0.5mg/L 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)+30g/L白砂糖+6g/L琼脂、pH5.8的固体培养基上,25℃,16/8h光周期培养;培养20~30天,即得到幼苗;
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