[发明专利]用于培养铁皮石斛褐斑病菌的含有特异氨基酸的培养基

说明书

技术领域

本发明属于微生物领域，特别的，属于采用培养方法来培养铁皮石斛褐斑病菌的培养方法。

背景技术

铁皮石斛(DendrobiumSw.)又名黑节草、云南铁皮，是兰科(Orchidaceae)多年生附生草本植物，是一种珍贵的中药材。早在《神农本草经》中就有记载，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身、镇痛消炎的功效。同时现代研究表明，石斛药材除具有本草记载的等功效外，还具有抗肿瘤、抗辐射、抗血小板凝集及增强机体免疫力等功效。近年来石斛药材的需求量不断增加，而栽培技术的不断创新使得人工种植石斛的面积不断增大，然而随着集中种植面积的增加，出现的问题也不断增多，石斛种植出现多种不同的病害，例如铁皮石斛褐斑病。石斛叶片染病后病斑初呈淡褐色至黑褐色的小点，后小点渐渐扩大为约5～6mm的病斑。这不仅影响石斛的品质，也影响石斛的产量，具统计褐斑病导致产量损失5％-10％。防止褐斑病的发生和扩增有助于提高石斛生产的产量和品质，确保石斛产业健康有序的发展。为了研究如何防治铁皮石斛的褐斑病，就需要首先培养褐斑病来进行一些方面的研究，例如研究该病菌的生物学特性，药效试验等筛选出合适的药物进行防治。但是，这种病菌难以培养，而且产量低，为此，需要提供如何高效率的培养褐斑病病菌进行相关方面的研究。

发明内容

为了解决以上问题，本发明提供一种培养铁皮石斛褐斑病菌的方法，该方法包括：提供草莓煎汁培养基，其中该草莓煎汁培养基的组成为：草莓茎叶200g，蔗糖20g，琼脂20g，添加水至1000ml。

优选的，草莓茎叶200g经过如下过程进行制备：在煎锅中放入1000mL蒸馏水和200g草莓茎叶，煮沸5min后，过滤去除茎叶，加入20g蔗糖，定容至1000mL。

优选的，培养的PH值为7.

优选的，培养的温度为25-30摄氏度。

优选的，所述的铁皮石斛褐斑病菌为多喙茎点霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

另一方面，本发明提供草莓煎汁培养基在制作培养铁皮石斛褐斑病菌培养基中的用途，其中所述的草莓煎汁培养基由下列组分组成：草莓茎叶200g，蔗糖20g，琼脂20g。

优选的，优选的，草莓茎叶200g经过如下过程进行制备：在煎锅中放入1000mL蒸馏水和200g草莓茎叶，煮沸5min，过滤去除茎叶，加入20g蔗糖，定容至1000mL。

优选的，培养的PH值为7。

优选的，培养的温度为25-30摄氏度。

优选的，所述的铁皮石斛褐斑病菌为多喙茎点霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

另一方面，本发明提供一种培养铁皮石斛褐斑病菌的方法，该方法包括提供一种培养基，该培养的组成如下：氮源化合物3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g，氯化钾0.5g，硫酸亚铁0.01g，糖源物质30g，琼脂20g，添加水至1000mL，其中所述的糖源物质为麦芽糖、蔗糖、菊糖、核糖、果糖、乳糖、鼠李糖、山梨醇或纤维乙糖。

优选的，糖源物质为纤维乙糖。

优选的，所述的氮源化合物为L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸或硝酸钾。

优选的，所述的氮源化合物为L-脯氨酸、L-丝氨酸和L-色氨酸。

一种培养基在用于制备培养铁皮石斛褐斑病菌培养基中的用途，其中，所述的培养基的组成如下：氮源(氨基酸)化合物3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g，氯化钾0.5g，硫酸亚铁0.01g，糖源物质30g，琼脂20g，其中所述的糖源物质为麦芽糖、蔗糖、菊糖、核糖、果糖、乳糖、鼠李糖、山梨醇或纤维乙糖。

优选的，糖源物质为纤维乙糖。

优选的，所述的氨基酸化合物为L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸。

优选的，所述的氨基酸化合物为L-脯氨酸、L-丝氨酸和L-色氨酸。

优选的，所述的铁皮石斛褐斑病菌为多喙茎点霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

有效效果

通过本发明的特异培养基和培养方法，可以获得优质、大量的褐斑病菌，为研究褐斑病菌提供了有益的材料，特别是可以提供大量的孢子。