[发明专利]抗CD20抗原的抗体L3H3及其应用

说明书

本发明公开了一种抗CD20抗原的抗体L3H3及其应用。本发明提供的抗CD20抗原，命名为L3H3抗体，是一种IgG，由轻链和重链组成；所述轻链中的轻链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3依次为序列表的序列1自N末端第61‑79位氨基酸残基、第89‑102位氨基酸残基和第112‑123位氨基酸残基；所述重链中的重链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3依次为序列表的序列3自N末端第50‑60位氨基酸残基、第82‑97位氨基酸残基和第107‑120位氨基酸残基。本发明还保护所述L3H3抗体在制备用于B细胞淋巴瘤治疗药物中的应用。本发明对于B细胞淋巴瘤的治疗具有重大应用价值。

技术领域

本发明涉及一种抗CD20抗原的抗体L3H3及其应用。

背景技术

非霍奇金淋巴瘤(Non Hodgkin’s lymphoma,NHL)是一种生物学特性和组织形态各异的淋巴系统恶性肿瘤,是威胁人类生命的十大恶性肿瘤之一,淋巴系统恶性肿瘤中约有85％来源于B细胞。

CD20分子是一种B细胞分化抗原,它在95％以上的B细胞淋巴瘤中表达,而在造血干细胞、浆细胞和其他正常组织中不表达。CD20分子量为33KD，是由279个氨基酸残基组成的非糖基化蛋白质，起始表达于pre-B细胞阶段,至B细胞终端分化成浆细胞时结束,其一直被认为是B淋巴细胞表面特有的标识。CD20分子有4个跨膜区，在第三和第四跨膜区之间有一个由43个氨基酸残基组成的环区，构成其主要的抗原表位。CD20分子在恶性B淋巴细胞膜表面表达稳定，与抗体结合后不会从肿瘤细胞膜表面脱落，在血液循环中也无游离的CD20分子存在，上述特有的表达方式及生物学作用决定了CD20是B细胞淋巴瘤单克隆抗体治疗时的理想靶抗原。

1997，美国食品与药品监督局(FDA)批准了抗CD20的人鼠嵌合抗体利妥昔单抗(Rituximab，RTX)用于NHL的治疗。1998年，欧盟也批准RTX上市，RTX与CD20分子结合能引发淋巴瘤细胞溶解的免疫反应，可能的作用机制包括：抗体依赖的细胞毒作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒作用(CDC)、诱导凋亡。RTX虽可增强抗体的生物学效应，但由于其是人鼠嵌合抗体，故在临床中会产生严重的人抗鼠抗体反应(HAMA)，从而影响其功能的发挥。本研究计划通过计算机模拟，从抗人抗体库中筛选出构象与嵌合抗体相似，但免疫原性低亲和力高的人源化抗体,并对该人源化抗体ADCC与CDC效应进行检测。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗CD20抗原的抗体L3H3及其应用。

本发明提供的抗CD20抗原，命名为L3H3抗体，是一种IgG，由轻链和重链组成；所述轻链中的轻链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3依次为序列表的序列1自N末端第61-79位氨基酸残基、第89-102位氨基酸残基和第112-123位氨基酸残基；所述重链中的重链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3依次为序列表的序列3自N末端第50-60位氨基酸残基、第82-97位氨基酸残基和第107-120位氨基酸残基。

所述轻链具体可为如下(a)或(b)：(a)序列表的序列1自N末端第21-233位氨基酸残基组成的蛋白质；(b)序列表的序列1所示的蛋白质；

所述重链具体可为如下(c)或(d)：(c)序列表的序列3自N末端第20-471位氨基酸残基组成的蛋白质；(d)序列表的序列3所示的蛋白质。

本发明还保护编码所述L3H3抗体的基因，其特征在于：

编码所述轻链的基因为如下(1)或(2)或(3)：

(1)序列表的序列2自5’末端第80-718位核苷酸所示的DNA分子；

(2)序列表的序列2自5’末端第20-721位核苷酸所示的DNA分子；

(3)序列表的序列2所示的DNA分子；

编码所述重链的基因为如下(4)或(5)或(6)：