[发明专利]一种马西替坦有关物质的高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种马西替坦有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)样品配制：取马西替坦原料，用体积比为1∶4的碳酸氢铵缓冲液-乙腈溶液超声溶解，过滤或离心，配制成浓度为0.1-1.5mg/ml的马西替坦溶液；

(2)色谱条件设置：采用反相C18柱，柱温设置在20-50℃；以体积比为49∶49-54∶0.05-0.15的乙腈-水-甲酸混合液为流动相A，以体积比为85∶14-17∶0.05-0.15的乙腈-水-甲酸混合液为流动相B，进行梯度洗脱；流速为0.5-2.0ml/min；检测波长为250-270nm；洗脱液由流动相A和流动相B构成；

(3)检测：取步骤(1)配制的马西替坦溶液，进样10-50μl，记录色谱图。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中反相C18柱选自GraceSmartC18(250×4.6mm，5μm)、AgilentC18(250×4.6mm，5μm)或ApolloC18(250×4.6mm，5μm)。

3.根据权利要求1或2所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中反相C18柱为AgilentC18(250×4.6mm，5μm)。

4.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中流动相A为乙腈、水和甲酸按体积比49∶50-52∶0.08-0.12混合构成；流动相B中为乙腈、水和甲酸按体积比85∶14-16∶0.08-0.12混合构成。

5.根据权利要求1或4所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中流动相A为乙腈、水和甲酸按体积比49∶51∶0.1混合构成；流动相B中为乙腈、水和甲酸按体积比85∶15∶0.1混合构成。

6.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中梯度洗脱程序为：0-10min流动相A占洗脱液的体积百分比为100％，10min-35min流动相A占洗脱液的体积百分比由100％逐步递减至0％，35min-50min流动相A占洗脱液的体积百分比为0％，50min-52min流动相A占洗脱液的体积百分比由0％逐步递增至100％，52min-60min流动相A占洗脱液的体积百分比为100％。

7.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中梯度洗脱程序为：0-10min流动相A占洗脱液的体积百分比为100％，10min-35min流动相A占洗脱液的体积百分比由100％逐步递减至0％，35min-40min流动相A占洗脱液的体积百分比为0％，40min-42min流动相A占洗脱液的体积百分比由0％逐步递增至100％，42min-50min流动相A占洗脱液的体积百分比为100％。

8.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中流速为0.5-2.0ml/min，检测波长为250-270nm。

9.根据权利要求1或7所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(2)中流速为0.5-1.5ml/min；检测波长为255-265nm。

10.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于：

步骤(3)中进样量为10μl-20μl。