[发明专利]γ-聚谷氨酸的制备方法及护手霜和护手霜的制备方法

权利要求书

1.一种γ-聚谷氨酸的制备方法，采用菌株为地衣芽孢杆菌Bacilluslicheniformis， 该菌株已于2009年10月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏 号为CGMCCNO.3336；

具体包括以下步骤：

(1)菌种活化：将地衣芽孢杆菌CGMCCNO.3336原始菌株接种在斜面培养基上，于37℃ 培养16小时，如此活化2-3次，制备成熟的斜面种子；

(2)种子液的制备：将活化后的斜面种子接种于装有50ml液体培养基的500ml三角瓶 中，37℃，220rpm培养16小时至对数生长期；

所述种子培养基组成为：葡萄糖30g/L，酵母膏7g/L，胰蛋白胨10g/L，K₂HPO₄0.5g/L， MgSO₄·7H₂O0.5g/L，pH7.2，其余为水；

(3)发酵罐发酵：将步骤(2)中的种子液以5％的接种量接种于发酵罐，30L发酵罐发酵 培养基装液量为15L，初始发酵温度38-40℃，罐压0.01-0.05Mpa通风量0.5-1.0vvm，转速 400-600rpm；当发酵液OD₆₆₀在0.550-0.600时，并控制发酵温度30-35℃，调节转速至200- 350rpm，通风量1.5-2.0vvm，控制pH在7.2-7.5至发酵结束前2-6小时；

所述发酵培养基组分为：葡萄糖80g/L，氯化钠10g/L，MgSO₄·7H₂O1g/L，无水氯化钙1g/ L，FeSO₄·7H₂O0.02g/L，KCl0.5g/L，精氨酸0.8g/L，组氨酸0.5g/L，苏氨酸0.5g/L，甲硫氨 酸0.4g/L，谷氨酰胺0.5g/L，胆碱0.31g/L，吡哆醇0.001g/L，其余为水；

(4)聚谷氨酸的提取：发酵结束后离心去菌体，然后用5倍上清液体积的乙醇，醇沉析出 聚谷氨酸，然后在复溶于上清液体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉聚谷氨酸。同 时将上清液用流动相稀释数倍至γ-聚谷氨酸的含量在1-3g/L，通过高效液相对其分子量 进行检测，分子量在20万到200万道尔顿。

2.一种护手霜，其特征在于，包括下列重量份数的原料：蒸馏水20-30份、γ-聚谷氨酸 5-20份，普鲁兰多糖1-5份，维生素E0.05-0.5份，珍珠粉10-20份，羟苯甲酯1-3份，山梨醇1- 5份，维生素C0.05-0.5份，胶原蛋白0.05-5份。

3.一种权利要求3所述护手霜的制备方法，包括以下步骤：

A、将γ-聚谷氨酸和普鲁兰多糖先溶解于蒸馏水中，并搅拌均匀，使其成为粘稠状的液 体；

B、将珍珠粉用余量的水混匀后加入上述液体中，混合均匀，再依次加入胶原蛋白，维生 素E，维生素C，羟苯甲酯，山梨醇；在室温下搅拌混匀，得到混合液；

C、将混合液灌装于瓶内，密封即可得到添加了高分子聚谷氨酸的保湿护手霜。