[发明专利]一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法及其应用在审

专利信息
申请号: 201510934634.9 申请日: 2015-12-15
公开(公告)号: CN105384872A 公开(公告)日: 2016-03-09
发明(设计)人: 刘宏程;沈报春;杨倩 申请(专利权)人: 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所
主分类号: C08F222/14 分类号: C08F222/14;C08F220/06;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/30
代理公司: 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人: 董芙蓉
地址: 650223 云南省*** 国省代码: 云南;53
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 一种 青霉素 表面 分子 印迹 聚合物 制备 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法,其特征在于:将青霉素G钠溶于一定的溶液,所述一定的溶剂为二甲基亚砜(DMSO)和甲醇体积比为4:1的混合物;然后,加入功能单体搅拌,再加入交联剂、引发剂,氮气除氧,加热反应;反应结束后洗去模板分子青霉素G钠,干燥,即得青霉素G钠表面分子印迹聚合物。

2.根据权利要求1所述的一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法,其特征在于:所述功能单体为α-甲基丙烯酸(MAA)。

3.根据权利要求1所述的一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法,其特征在于:所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)。

4.根据权利要求1所述的一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法,其特征在于:所述引发剂为偶氮二异丁腈(AIBN)。

5.根据权利要求1所述的一种青霉素G钠表面分子印迹聚合物的制备方法,其特征在于:所述青霉素G钠表面分子印迹聚合物能检测牛奶中一定范围内的青霉素G钠残留。

6.青霉素G钠表面分子印迹聚合物的性能研究实验方法:其特征在于:包括以下步骤:

a、青霉素G钠标准溶液的配制:

将青霉素G钠溶于一定的溶液,配制成不同浓度的青霉素G钠标准溶液。

作为优选,所述溶剂采用甲醇溶剂。

b、标准曲线的绘制:

将不同浓度的青霉素G钠溶液,于264nm波长下,以不含青霉素G钠溶液的甲醇溶液为空白对照,分别测定吸光度。以吸光度为纵坐标,青霉素溶液的浓度为横坐标,绘制标准曲线。

c、结合动力学实验:

分别称取MIP和NIP,加入青霉素G钠溶液,室温下振荡,24h内取出混合液离心,取上清液用紫外分光光度计测定其吸光度,根据标准曲线计算不同吸附时间青霉素G钠的浓度。计算聚合物对青霉素G钠的结合量Q(μg/mg)。

Q=(Co-C1)·V/m

其中C0、C1分别表示吸附前后溶液中模板分子的浓度(μg/mL);V表示溶液的体积(mL);m表示加入的分子印迹聚合物的质量(mg)。绘制结合量与结合时间关系的动力学曲线。确定分子印迹聚合物的结合量Q、印迹因子α和最佳结合平衡时间。

α=Q(MIP)/Q(NIP)

其中Q(MIP)表示分子印迹聚合物的饱和结合量;Q(NIP)表示非分子印迹聚合物的饱和结合量。印迹因子α的大小代表了MIP的特异吸附性质,其数值越大,特异性越好,印迹效果就越强。

d、吸附等温曲线:

称取MIP,置于离心管中,不同浓度的青霉素G钠溶液。室温下振荡20h达到吸附平衡后,将混合液离心,取上清液测定吸光度,计算分子印迹聚合物饱和结合量Q,绘制吸附等温线。

e、特异性识别实验:

选取青霉素V钾、阿莫西林、头孢地尼、头孢克肟、头孢拉定、盐酸左氧氟沙星作为目标分子。分别称取MIP和NIP,置于试管中,加入青霉素G钠溶液。室温下振荡达到吸附平衡后,将各混合液离心,取上清液,测定吸光度,依据标准曲线计算结合前后溶液浓度的变化。采用选择因子(SelectinGFactor,β)来描述MIP的选择识别能力,计算出模板印迹因子α1和模板类似物的印迹因子α2,根据公式计算选择因子β:

β=α12

选择因子β的大小代表了MIP对模板类似物的选择分离能力,β数值越大,越容易使模板分子和模板类似物分离开。

7.青霉素G钠表面分子印迹聚合物检测牛奶中一定范围内的青霉素G钠残留的方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)牛奶样品的提取:

取牛奶样品置于离心管中,加入提取溶剂混匀,离心,重复上述操作,合并提取液,加入另一种提取溶液,调节pH,加热搅拌,得提取后的牛奶。

作为优选,所述提取溶剂为乙腈。

作为优选所述提取溶液为磷酸盐缓冲溶液(pH)。

(2)方法学验证:

a、准确度与批内精密度:

将牛奶样品均分到9支离心管中并标记,分别向其中加入青霉素G钠的标准溶液混匀,在溶液中分别加入准确称重的分子印迹聚合物,在室温下震荡达到吸附平衡后,将溶液离心。过滤,干燥,称重。根据聚合物前后质量差,计算回收率和相对标准偏差RSD。

回收率(%)=测得量/加入量×100%

b、检测限LOD:

用空白样品即不加牛奶样品的青霉素G钠,按方法学验证中准确度和批内精密度的方法计算标准偏差SD,再将3倍空白的SD作为检测限的估算值。

LOD=3S(S为空白样品的标准偏差)

(3)牛奶样品的测定:

离心管中加入分子印迹聚合物MIP,加入提取后的牛奶样品,室温震荡,离心,过滤,干燥,称重,计算青霉素G钠的含量。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所,未经云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510934634.9/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top