[发明专利]一种土壤呼吸测定的甲酚红比色法和测定装置

权利要求书

1.一种土壤呼吸测定的甲酚红比色法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

（1）溶剂配制：使用酸碱指示剂甲酚红和中性盐以及重碳酸盐配制成混合试剂，即甲酚 红试剂；

（2）吸取步骤（1）中定量的甲酚红试剂到塑料试管中，盖好盖子；

（3）将步骤（2）中盛有甲酚红试剂的塑料试管打开盖子后放入土壤呼吸测定装置中，置 于待测土壤表面密封后，开始计时，4-6h后取出塑料试管并盖上盖子；

（4）将步骤（3）中土壤呼吸后的甲酚红试剂在560nm波长下比色测定甲酚红试剂的吸光 度，依据标准曲线和空白对照计算土壤呼吸强度。

2.根据权利要求1所述的一种土壤呼吸测定的甲酚红比色法，其特征在于：所述步骤 （1）中甲酚红试剂包括每1000mL水中放入0.0188g甲酚红、13.4160gKCl和0.2520g NaHCO₃。

3.根据权利要求1所述的一种土壤呼吸测定的甲酚红比色法，其特征在于：所述步骤 （4）中标准曲线为：使用的试剂包括0.1mol/L的NaHCO₃，0.2mol/L的H₂SO₄和权利要求2中的 甲酚红试剂，具体方法步骤是：a）选取27个50mL的小烧杯，分别吸取0mL、1mL、2mL、3mL、4 mL、5mL、7.5mL、10mL、20mL的0.1mol/L的NaHCO₃放入其中的9个小烧杯中，并补加蒸馏 水或去离子水至20mL；b）另准备9个小烧杯中分别加入20mL的0.2mol/L的H₂SO₄；c）最后准备 9个小烧杯中分别都放入1只盛有5mL甲酚红试剂的离心管，并打开盖子；d）将分别盛有 NaHCO₃、H₂SO₄和甲酚红试剂的离心管的小烧杯各一个组成一组放入密封装置中密封，总的 九组；e）然后隔着密封袋将盛有H₂SO₄的小烧杯中的H₂SO₄缓慢地倒入盛有NaHCO₃的小烧杯 中，并开始计时，4-6h后取出盛有甲酚红的离心管，并迅速盖上盖子，560nm波长下比色测定 吸光度，以每个小烧杯释放出的CO₂的量为纵坐标，以离心管中甲酚红的吸光度为横坐标， 绘制标准曲线，重复3次。

4.根据权利要求1所述的一种土壤呼吸测定的甲酚红比色法，其特征在于：所述步骤 （4）中土壤呼吸强度包括田间土壤呼吸强度和培养呼吸强度，其计算公式如下：

上式中：m₂-为田间土壤CO₂的质量（）；

S-密封装置与待测田间土壤接触的呼吸面积（m²）；

T₁-田间土壤呼吸时间（h）；

m₂-为培养土壤CO₂的质量（）；

M-培养土壤的质量（）；

T₂-培养土壤呼吸时间（h）。

5.一种土壤呼吸测定装置，其特征在于：所述塑料试管（1）和密封罩一（2），所述塑料试 管（1）固定连接在试管架（3）上，所述试管架（3）插接到待测土壤（4）中，所述密封罩一（2）盖 合在待测土壤（4）表面，将塑料试管（1）放置其中，下端一周设置土壤密封层（5）。

6.根据权利要求1所述的一种土壤呼吸测定装置，其特征在于：所述试管架（3）包括采 用钢丝设置成螺旋状的套接部（6）和将钢丝螺旋缩小成套接部的底侧支撑部（7），所述底侧 支撑部（7）将钢丝绕中心向下延伸成插接杆（8）。

7.一种土壤呼吸测定装置，其特征在于：所述塑料试管（1）、待测土壤容器（9）和密封罩 二（10），所述塑料试管（1）放置到烧杯（11）中，所述待测土壤容器（9）和塑料试管（1）放置到 密封罩二（10）中保持全密封。