[发明专利]一种粘质沙雷氏菌S-JS1及其应用

说明书

一、技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种粘质沙雷氏菌S-JS1及其在害虫防治中的应用。

二、技术背景

褐飞虱Nilaparvatalugens隶属于同翅目(Homoptera)、飞虱科(Delphacidae)，是我国和许多亚洲国家当前水稻上的首要害虫，对水稻的安全生产造成了严重威胁。在我国褐飞虱每年为害的水稻种植面积超过4×10⁶hm²，仅2005和2008年，褐飞虱直接为害造成中国的稻谷损失达2.7×10⁹kg。长期以来，化学杀虫剂是控制褐飞虱的主要途径，但残留、抗性、再猖獗、伤害害虫天敌、破坏生态平衡等对农业的可持续发展诸多不利的影响也随之而来，并呈日益加重的趋势。因此，对褐飞虱的防治宜采用以生物防治为主的综合治理措施。

甜菜夜蛾Spodopteraexigua和斜纹夜蛾Spodopteralitura(Fabricius)均属于鳞翅目夜蛾科，是近年来我国蔬菜上发生比较严重的害虫，由于其繁殖能力强，世代重叠，且寄主范围广泛，给防治带来很大困难。目前，对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的防治仍以化学防治为主，但因大量、高频使用农药，导致甜菜夜蛾和斜纹夜蛾对现有的多种杀虫剂产生了较高的抗性。因此，如何在生态安全的前提下，控制害虫为害和提高农业产量成为当前农业生产的焦点问题。从探索自然界中的生物防治资源出发，开发利用昆虫病原微生物防治害虫，为解决这一问题提供了有效途径。

粘质沙雷氏菌Serratiamarcescens是一种广泛存在于自然界中的细菌，能够产生鲜红色素，在健康、感染或死亡的昆虫体中，经常能够分离到该细菌。目前，由于粘质沙雷氏菌对昆虫的高致病性和对害虫生物防治的巨大潜力而受到国内外学者的广泛关注。已有研究表明，粘质沙雷氏菌可感染棉铃虫、烟青虫、蚜虫、白蚁、蝗虫、天牛、红棕象甲、黄曲条跳甲等多种害虫，是一类重要的昆虫病原细菌。而且同类菌株嗜虫沙雷氏菌(Serratiaentomophila)现已开发为微生物杀虫剂产品，广泛用于金龟甲的生物防治。

三、发明内容

1.本发明的目的在于提供一种粘质沙雷氏菌及其应用，具体而言是粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)，编号为S-JS1。旨在通过生物技术手段防治褐飞虱、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾，避免或减少不合理使用化学农药带来的抗药性问题。

2.一种粘质沙雷氏菌S-JS1，是发明人从大量自然罹病褐飞虱虫体里分离出的众多菌株中筛选出来的，对褐飞虱、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾均具有较好的防治效果。该菌株具有以下特征：在LB固体培养基上28±1℃生长2天，菌落为红色或褐色，菌落细胞有鞭毛，细胞长0.5-1.2μm，宽0.3-0.5μm，最佳生长温度24-30℃。

3.本发明所解决的另一个问题是提供用于防治褐飞虱、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的菌剂。

4.本发明所提供的菌剂为菌悬液，其浓度为10⁹cfu/ml。

5.本发明所提供的菌剂的有效成分是LB固体培养基培养的粘质沙雷氏菌S-JS1细胞

6.本发明所提供的或所述的粘质沙雷氏菌S-JS1可用于防治褐飞虱、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾。

四、具体实施方式

(1)LB液体培养基包括胰蛋白胨10克，氯化钠10克，酵母提取物5克，蒸馏水1升，pH值7.0-7.2，121℃灭菌30min。

(2)LB固体培养基包括胰蛋白胨10克，氯化钠10克，酵母提取物5克，琼脂20克，蒸馏水1升，pH值7.0-7.2，121℃灭菌30min。

(3)固体培养法，将无菌水稀释后的粘质沙雷氏菌，涂板于LB固体培养基，优先置于28±1℃，黑暗培养48h。

(4)液体培养法，将粘质沙雷氏菌接种在LB液体培养基中，然后将其置于摇床10-42℃，100-400转/分钟转速，密闭遮光培养12-72h。

实施例1：

取褐飞虱3龄若虫、长翅和短翅成虫，置于含有水稻苗的塑料杯中，以8×10⁹cfu/ml浓度喷雾处理，5天后褐飞虱的校正死亡率分别为67.47％、63.58％和78.28％。死亡率如附图1。

实施例2：

取甜菜夜蛾和斜纹夜蛾3龄幼虫，饲喂添加100μl浓度为10⁸cfu/ml菌液的饲料，5天后甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的校正死亡率分别为45.64％和32.20％；9天后校正死亡率分别为76.36％和62.06％，如附图2。

五、附图说明