[发明专利]使用粪便或来自粪便的液体样品采用活性炭预处理而确定微生物存在的方法及相关装置

说明书

技术领域

本发明涉及免疫测定的技术领域，并且特别是用于检测存在于患者中的病原体的免疫测定，所述病原体的存在可以使用所述患者的粪便来证实。更确切地，本发明涉及一种用于在患者粪便的或获得自患者粪便的液体样品中检测微生物的至少一种抗原的方法，并且还涉及一种用于免疫色谱法检测的、适合于执行这种方法的装置。

背景技术

腹泻代表了全世界范围内的一个主要健康问题。在发达国家，肠胃炎的经济影响是显著的，并且用于对其治疗所产生的医疗费用代表了非常高的财政支出。这些感染是显著发病率的致因，并且代表了医疗咨询的主要原因之一。在贫困国家，非常频繁的肠胃炎一整年都持续存在，引起非常高的死亡率。不具有获得饮用水途径的人群是最严重地受到这种疾病的感染的。

造成肠胃炎的因子可以是细菌、病毒或寄生性病原体。通过对此类病原体举例的方式，可以提及以下微生物：艰难梭菌、沙门氏菌属、志贺菌属、轮状病毒、诺如病毒、腺病毒、痢疾阿米巴(Entamoebahistolytica)。

诺如病毒，特别对环境因子有抗性，日益频繁地牵涉在腹泻的发作中。该病毒刚好在工业化国家中如在发展中国家中存在地一样多，并且涉及影响所有人群部分的肠胃炎流行病。根据由M.M.帕特尔(Patel)进行的文献研究(PatelMm.，等人，诺如病毒在散发性肠胃炎中的作用的系统文献综述(Systematicliteraturereviewofroleofnorovirusinsporadicgastroenteritis).新兴传染病(EmergInfectDis.)2008年8月；14(8):1224-31)，对于900000个医学问诊，诺如病毒显现在生活于工业化国家中的五岁之下的儿童中是致因，并且不少于64000个病例显现需要住院治疗。在发展中国家，一百万个儿童显现受到影响，并且死亡数目是在每年200000例死亡左右。在住院治疗的五岁之下的儿童中，它是涉及肠胃病的居于轮状病毒之后的第二大常见致病因子(洛罗(Lorrot)M.，等人，住院治疗儿童中肠胃病的流行病学和临床特征：在法国巴黎医院中2年期间的前瞻调查(Epidemiologyandclinicalfeaturesofgastroenteritisinhospitalisedchildren:prospectivesurveyduring2-yearsperiodinaParisianhospital,France).欧洲临床微生物感染疾病杂志(EurJClinMicrobiolInfectDis.)2011年3月；30(3):361-8.)。

因此，如果存在肠胃病的体征，有必要进行使得有可能鉴别一种或多种致病因子的测试，从而快速提供适当的医疗响应。造成肠胃病的因子常常是经由粪便传播的。

由于症状仅持续几天，没有兴趣去寻找抗体，因为免疫应答太晚。为了进行常规诊断，提出了基于寻找粪便样本中的病毒和/或至少一种代表病毒存在的分析物的免疫色谱技术(也称为侧流免疫测定技术)。这些技术易于执行，同时给出了快速回答：结果可以在执行测定方案15分钟后知道。由K.安贝特(Ambert)-巴莱(Balay)和P.波蒂埃(Pothier)在2012年11月进行的研究呈现了在诺和病毒的情况下，关于可在市场获得的免疫色谱测试的现有技术：“对用于快速检测粪便样品中诺和病毒的4个免疫色谱测试的评价(Evaluationof4immunochromatographictestsforrapiddetectionofnorovirusinfaecalsamples)”.临床病毒学(Clin.Virol)2013年3月；56(3):194-8。对于在此公开物中报道的各种商业测试的灵敏度结果在下文重现：

这些结果显示，可商购的免疫色谱测试在寻找诺和病毒方面的灵敏度是低的。

粪便是非常复杂的介质，其包括肠道菌群的共生菌、上皮细胞、来自消化的残渣等的存在。为了尝试改进检测灵敏度，这需要在测试之前处理粪便样品，目的在于检测与腹泻相关的一种或多种病原体，这是为了保持存在于粪便中的可能会干扰其检测的化合物。