[发明专利]检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的引物对及方法

说明书

本发明公开了一种检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的引物对，该引物对中，一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示，另一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示，该引物检测的特异性良好、灵敏度高；本发明还提供了检测该菌株的方法，包括DNA提取、PCR扩增及电泳检测分析，该方法能够快速检测出菌株的数量，检测特异性高，能够区分Lactobacillus paracasei N1115(CGMCC4691)菌和同源性较高的其他菌株。本发明适用于对Lactobacillus paracasei N1115(CGMCC4691)菌株进行检测，进一步地对食品或乳制品中Lactobacillus paracasei N1115(CGMCC4691)菌株进行检测计数。

技术领域

本发明属于生物检测领域，涉及一种检测植物乳杆菌的引物对及方法，具体地说是一种检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的引物对及方法。

背景技术

Lactobacillus paracasei N1115 (CGMCC4691) 是具有优良益生特性的乳杆菌。该菌株在消化系统中具有优异的耐受胃酸、胆盐和牛磺胆酸钠水解的能力，其具有乳杆菌共同的特性，即为革兰氏阳性、过氧化氢酶试验阴性、硝酸盐还原试验阴性、不液化明胶、无运动性、能在pH4.5的BLB液体培养基中生长发育。只有在对Lactobacillus paracaseiN1115 (CGMCC4691) 进行准确定量的基础上，才能够更有针对性地深入了解适宜Lactobacillus paracasei N1115 (CGMCC4691) 体内定植的条件，从而更进一步地开发出具有相对更为优良的Lactobacillus paracasei N1115 (CGMCC4691)体内定植率的产品，更好地发挥Lactobacillus paracasei N1115 (CGMCC4691) 的作用。

由于同种益生菌不同菌株之间的相似性超过了99%，常用的分子生物学手段很难从菌株水平对益生菌进行区分，因此，需要根据不同益生菌之间的遗传结构和特点，找出不同菌株的专有特征，并从菌株水平对该菌株进行分子标记，寻找特异性的检测方法显得尤为重要。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的引物对，该引物对中，一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示，另一条引物的序列如SEQID NO.2所示，该引物检测的特异性良好、灵敏度高；

本发明还提供了利用前述引物对检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的方法，包括DNA提取、PCR扩增及电泳检测分析，该方法能够快速检测出菌株的数量，检测特异性高，能够区分Lactobacillus paracasei N1115 (CGMCC4691) 菌和同源性较高的其他菌株。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的引物对，该引物对中，一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示，另一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种检测Lactobacillus paracasei N1115菌株的方法，它按照如下的步骤顺序进行：

1）提取待测样品菌株DNA，得A；

2）以A为模板，以前述的引物对进行PCR反应，得B；

3）将B进行电泳检测，具有前述的引物扩增片段的样品中存在Lactobacillusparacasei N1115菌株。

作为本发明的一种限定，所述的PCR 扩增体系包括2×PCR Mix 10μL ,40mmol/L上游引物和下游引物各1μL，40 ng/μL的DNA模板1μL。