[发明专利]用于水产养殖场现场发酵的地衣芽孢杆菌制剂及其应用

权利要求书

1.用于水产养殖场现场发酵的地衣芽孢杆菌制剂，其特征在于，制备该地衣芽孢杆菌制剂的原料为：地衣芽孢杆菌菌粉50-200份，硫酸粘杆菌素5-50份，纳他霉素1-6份，肌苷20-100份，玉米粉50-200份，玉米浆粉50-200份，氯化钠50-200份，丝氨酸20-100份，果糖20-50份，红糖50-200份；该用于水产养殖场现场发酵的地衣芽孢杆菌制剂的制备方法包括以下步骤：

、地衣芽孢杆菌菌粉的制备

取出地衣芽孢杆菌菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时；在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时；

种子采用5%的接种量，接种至5L大三角瓶中，装液量为2L的LB培养基，37℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，活菌含量超过20亿CFU/ mL，即可作为地衣芽孢杆菌液体菌种，接种至1000L发酵培养基，接种量为5%，开搅拌120r/min，每分钟通气量为液/气1：0.8，37℃培养16-24小时，待芽孢含量不低于60亿CFU/ mL，即可结束发酵，板框过滤除水，剩下菌体加轻质碳酸钙，调节菌浓度为100亿CFU/g，粉碎过100目筛，即得到地衣芽孢杆菌菌粉；其中所述LB培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%；

其中，所述发酵培养基：葡萄糖10g/L，玉米粉20 g/L， 玉米浆粉10 g/L，豆粕粉20 g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸锰0.5 g/L，磷酸二氢钠0.5 g/L，磷酸氢二钠2.3 g/L，pH7.2；

各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；

、混合，包装

将硫酸粘杆菌素5-50份，纳他霉素1-6份，肌苷20-100份，玉米粉50-200份，玉米浆粉50-200份，氯化钠50-200份，丝氨酸20-100份，果糖20-50份，红糖50-200份，放置密封搅拌罐中搅拌20-30分钟，混合均匀，再将步骤制备的地衣芽孢杆菌菌粉50-200份加入搅拌罐中搅拌均匀后，分装500克/包，真空包装，即得到用于水产养殖场现场发酵的地衣芽孢杆菌制剂；

该地衣芽孢杆菌制剂用于水产养殖场现场发酵的应用包括以下步骤：一、将地衣芽孢杆菌制剂与水的比例按1：10至1：30的比例搅拌均匀，调PH至8-8.2，前12小时每分钟通空气量，液气比为1：0.5， 12小时后通气量为1：0.8，培养24小时后即为现场发酵的地衣芽孢杆菌的发酵液；

二，用于养殖池塘调水，将步骤一所制备的地衣芽孢杆菌发酵酵液以1：50至1：100的比例稀释，全塘泼洒，其发酵液的用量为1-2L/亩；

三，用于调节养殖水产动物肠道，将步骤一制备的地衣芽孢杆菌发酵液以饲料的1%-2%的量与饲料拌匀饲喂；

其中，步骤一所述的水是井水，干净河水，放置一天以后的自来水中的一种；

其中，步骤一所述的空气是未经过滤或未经过灭菌的。