[发明专利]黄瓜果实栅栏状表皮细胞基因Pe的Indel标记及其应用

权利要求书

1.一种与黄瓜果实栅栏状表皮细胞基因Pe紧密连锁的Indel标记Indelpe02的引物，其特征在于：具有如下核苷酸序列：

Indelpe02-F/Indelpe02-R：

TCTCCTCCTATACATTCTCA/GAAGATTATGAGGATGAGAG

所述引物扩增的与黄瓜果实栅栏状表皮细胞基因Pe连锁的特征条带为125bp，其核苷酸序列如SeqIDNo.1所示；

所述引物扩增的与黄瓜果实扁平状表皮细胞基因pe连锁的特征条带为130bp，其核苷酸序列如SeqIDNo.2所示。

2.用于筛选包含果实栅栏状表皮细胞基因Pe的黄瓜材料的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的Indel标记Indelpe02的引物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括进行PCR反应和/或电泳所需的试剂。

4.用于筛选具有果实栅栏状表皮细胞基因Pe的黄瓜材料的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的Indel标记Indelpe02的引物和/或权利要求2或3所述的试剂盒进行如下步骤：

(1)采用所述Indel标记Indelpe02的引物对待选黄瓜材料的基因组DNA进行PCR扩增；

(2)对扩增结果进行凝胶电泳检测；

(3)从检测结果中筛选出现与黄瓜果实栅栏状表皮细胞基因Pe连锁的Indel标记特征条带一致的材料，所述与黄瓜果实栅栏状表皮细胞基因Pe连锁的Indel标记特征条带为125bp，其核苷酸序列如SeqIDNo.1所示。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述PCR扩增的反应体系为:1.5ng/μlDNA模板，所述引物正向和反向各5ng/μl，0.5μl/μlGoGreenMasterMix，其余为双蒸水。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其中，所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性4分钟；94℃变性15秒，55℃退火15秒，72℃延伸30秒，35个循环；72℃保温5分钟，16℃保存。

7.根据权利要求4所述的应用，其中所述凝胶电泳检测指，采用6％的非变性聚丙烯酰胺凝胶，于150V恒功率电泳分离，最后银染显色。

8.权利要求2或3所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，组装试剂盒的试剂中包括权利要求1所述的Indel标记Indelpe02的引物，或

在标有筛选含果实栅栏状表皮细胞基因Pe的黄瓜材料的用途的包装内装有权利要求1所述的Indel标记Indelpe02的引物。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，组装试剂盒的试剂中还包括PCR反应和/或电泳所需的试剂，或

在标有筛选含果实栅栏状表皮细胞基因Pe的黄瓜材料的用途的包装内装有PCR反应和/或电泳所需的试剂。