[发明专利]一种鞍带石斑鱼精子大容量、高效超低温冷冻保存的方法在审
| 申请号： | 201510957452.3 | 申请日： | 2015-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN105532639A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 刘清华;肖志忠;李军;王学颖 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 石斑鱼 精子 容量 高效 超低温 冷冻 保存 方法 | ||
1.一种鞍带石斑鱼精子大容量、高效超低温冷冻保存的方法，其特征在于：将鞍带石斑鱼的精液与抗冻液按体积比2：1-4:1的比例混合，混合后经过一步平衡，三步降温处理后投入到液氮(-196℃)，分装保存；所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成；
其中，稀释液为NaCl7.5-7.8g/L，MgSO4·7H2O0.1-0.12g/L，CaCl20.1-0.12g/L,Na2HPO4·2H2O0.1-0.12g/L，NaHCO30.4-0.5g/L；15-20％PG(丙二醇)；添加剂：海藻糖15-20g/L，蛋黄5-10％。(百分比皆以稀释液为基准加入)。
2.按权利要求1所述的鞍带石斑鱼精子高效超低温冷冻保存的方法，其特征在于：所述鞍带石斑鱼的精液与抗冻液在碎冰中(0℃)轻轻震荡、充分混匀5-8min，而后以-12℃--15℃/min的降温速率使温度降至-140℃--150℃，然后投入到液氮(-196℃)，分装保存。
3.按权利要求1或2所述的鞍带石斑鱼精子高效超低温冷冻保存的方法，其特征在于：所述抗冻液在使用前放置于0℃冰箱中预冷过夜，待用。
4.按权利要求1所述的鞍带石斑鱼精子高效超低温冷冻保存的方法，其特征在于：将混合均匀的鞍带石斑鱼精液分装于5ml-10ml的冻存管中。
5.按权利要求1所述的鞍带石斑鱼精子高效超低温冷冻保存的方法，其特征在于：将经液氮处理分装保存的鞍带石斑鱼冻精进行解冻，将其直接放入35-37℃水浴110s-130s，然后置于室温18-20℃放置至完全融化，而后于自然海水中激活。
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