[发明专利]用于肝癌早期预警和筛查的试剂盒

说明书

本发明属于分子生物学(肿瘤筛查)领域，具体涉及一种可用于肝癌早期预警和筛查的技术。本发明属于分子生物学(肿瘤筛查)领域，具体涉及一种用于肝癌早期预警和筛查的技术。本发明要解决的技术问题是为肝癌早期预测提供一种新选择。本发明的技术方案是用于肝癌早期预警和筛查的试剂盒，包括扩增如下基因的引物：启动区CpG岛甲基化状态的RASSF相关区域家族1A基因(RASSF1A)、p16基因、胚肝血影蛋白(ELF)、细胞因子信号转导抑制因子3(suppressors of cytokine signaling)基因、分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled‑related protein)基因和基因组重复序列LINE1。本发明为本领域早期肝癌以及肝硬化预警和筛查提供了新的有效检测方法，且成本低，使用起来也非常方便，灵敏度高，特异性好，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于分子生物学(肿瘤筛查)领域，具体涉及一种可用于肝癌早期预警和筛查的技术。

背景技术

人原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)指肝细胞或肝内胆管细胞发生的癌,为我国常见恶性肿瘤之一,其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第三位,仅次于胃癌和食管癌。我国约有1.2亿乙型肝炎表面抗原携带者,每年约有300万人可能从急性乙型肝炎发展为慢性肝炎,死于肝病30万人,其中12万人死于HCC，在我国，乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染是导致发展原发性肝癌(HCC)的最直接原因，大多数肝癌患者的发病进展过程表现为慢性肝炎(chronic hepatitis,CH)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)到HCC的发展进程。而在全世界每年新发现的肝癌病人中，其中就有42.5％发生在中国，因此中国是一个肝癌大国。对于肝癌患者来说早期手术治疗是根本的方法。目前早期对小肝癌行肝叶切除，可有根治的希望。然而诊断较晚，事实上80％以上肝癌患者被诊断时肿瘤已进入中晚期而失去手术机会。

通过临床研究表明，肝癌发现得越早，治疗效果越好，能提高病人的预后及存活率，因此早期预警筛查则显得尤其重要。然而，目前临床上早期筛查HCC的主要指标是血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平和影像学B超监测，但是一部分HCC患者血清AFP长期保持低水平(<20ng/ml)，而B超在检测和进一步判断结节的特征时有一定的局限性，从而影响到肝癌早期诊断的灵敏性。但目前临床上未有十分有效的早期检测方法，因此建立高灵敏，经济，简便的分子技术筛查方法尤为重要。

研究表明，肝细胞癌组织中存在多种肿瘤相关基因CpG岛的甲基化，构成其独特的甲基化谱，成为肝细胞癌的表观遗传标志，且在肿瘤发生的癌变前阶段中，肿瘤相关因子启动子甲基化异常在肿瘤发生发展中起重要作用。有研究认为，部分抑癌基因的异常甲基化在正常肝和慢性肝炎阶段未发现，肝硬化(liver cirrhosis,LC)开始出现，到HCC阶段有累加的趋势，而部分癌基因则与之相反，正常肝和慢性肝炎阶段至HCC阶段甲基化程度逐渐降低，这为肿瘤的早期诊断提供新的干预靶点。