[发明专利]一种功能化纳米配合物基因导入材料及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及基因导入材料技术领域，具体涉及一种功能化纳米配合物基因导入材料及其制备方法和应用。一种功能化纳米配合物基因导入材料的制备方法，包括：步骤一，硫酸亚铁水溶液通氮气；步骤二，加入氟尿嘧啶水溶液；步骤三，超声；步骤四，静置；步骤五，离心并烘干。本发明制得的功能化纳米配合物基因导入材料为一种平均直径为150nm左右的纳米球状材料，该功能化纳米配合物基因导入材料与绿色荧光蛋白质粒基因pGFP结合，用于转染，具有转染效率高、细胞相容性好、细胞生存率高的优点；在人乳腺癌细胞中，该球状功能化纳米配合物基因导入材料和pEGFP‑C1的联合体的转染效率达到45%左右。

技术领域

本发明涉及基因导入材料技术领域，具体涉及一种功能化纳米配合物基因导入材料及其制备方法和应用。

背景技术

随着人类基因图谱测定的完成，我们对人类疾病发病机制的认识在基因水平上取得了突破性的进展。目前研究表明，有许多疾病的发生及发展与基因密切相关。如果可以筛查出与疾病特异相关的基因片段或者基因突变，就可以有针对性地在基因水平上进行特异治疗，如通过导入相关缺失基因或沉默基因，以增强相关缺失功能或者沉默致病基因，从而达到彻底治疗的目的。将目的基因安全有效地导入生物体内是目前此研究领域中的关键和难点。

基因导入方法可以分为两类：第一类是病毒型基因导入方法，是以逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒为载体；第二类是非病毒型基因导入方法，如显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀、阳离子脂质体法、以及利用新兴的纳米基因导入材料进行基因转染。

病毒型基因导入方法存在许多严重的不足，例如病毒转染时有可能激活原癌基因。因此，非病毒型基因导入方法是目前的研究热点，但是，上述所述的非病毒型基因导入方法均存在不足：显微注射一次只能处理一个细胞，其转染效率非常低；基因枪的穿透力十分有限；磷酸钙共沉淀法的转染效率受温度、浓度、操作环境等众多因素影响，转染结果很不稳定；阳离子脂质体法虽然表现出良好的转染效率，但是阳离子脂质体因毒性高，使得阳离子脂质体法的应用受到了限制；现有技术中的纳米基因导入材料存在生产成本高、制备用原料不易得、难以普及推广应用的缺点。

发明内容

本发明的目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种功能化纳米配合物基因导入材料的制备方法。

本发明的目的之二在于针对现有技术的不足，提供一种功能化纳米配合物基因导入材料。

本发明的目的之三在于针对现有技术的不足，提供一种功能化纳米配合物基因导入材料的应用。

为了实现上述目的之一，本发明采用如下技术方案：

一种功能化纳米配合物基因导入材料的制备方法，它包括以下步骤：

步骤一，硫酸亚铁水溶液通氮气：往硫酸亚铁水溶液中通入氮气；

步骤二，加入氟尿嘧啶水溶液：往步骤一中持续通入氮气的硫酸亚铁水溶液中加入氟尿嘧啶水溶液，然后在一定温度下搅拌一定时间，得到混合物；

步骤三，超声：对步骤二中得到的混合物继续通入氮气，然后对步骤二得到的混合物进行超声震荡一定时间；

步骤四，静置：对步骤三完成超声震荡后的混合物进行静置一定时间；

步骤五，离心并烘干：对步骤四完成静置的混合物进行离心，得到沉淀物，然后对沉淀物进行烘干，即制得功能化纳米配合物基因导入材料。

上述技术方案中，所述步骤一硫酸亚铁水溶液通氮气步骤中，所述硫酸亚铁水溶液的质量体积浓度为0.5g/L~5g/L。

上述技术方案中，所述步骤二加入氟尿嘧啶水溶液步骤中，所述氟尿嘧啶水溶液的摩尔浓度为0.05mol/L~0.5 mol/L。

上述技术方案中，所述步骤二加入氟尿嘧啶水溶液步骤中，所述硫酸亚铁水溶液与所述氟尿嘧啶水溶液的摩尔比为1~5：1。