[发明专利]一株产井冈霉素的黄麻链霉菌及其应用

说明书

本发明公开了一株产井冈霉素的黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii)KN‑1625，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2015710。该菌能提高井冈霉素发酵液中井冈霉素A的含量，降低井冈霉素B的含量，与出发菌株相比，井冈霉素A含量提高了47％，B/A降低了37.56％。且井冈霉素产量稳定在30000μg/mL以上，KN‑1625菌株的遗传稳定性好，传至四代产井冈霉素水平与第一代相当。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株产井冈霉素的黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii)，本发明还涉及该菌株的应用。

背景技术

井冈霉素是一种农用抗生素，能有效防治纹枯病，是“防效高、无药害、无污染”的环保型农药，是当今产量和使用面积最大的农用抗生素。井冈霉素属于氨基糖苷类，主要由A、B、C、D、E、F等组分组成，后来又发现G和H等成份，但只有A组分对纹枯病的防治作用最强，高含量井冈霉素A不仅可以作为农药使用，还可以作为生产医药的中间体，其应用前景十分广阔。然而目前采用微生物发酵方法生产的井冈霉素杂质含量较高，尤其是井冈霉素B的含量较高，产品质量普遍较差。

发明内容

本发明的目的是通过对黄麻链霉菌株进行人工诱变，从而获得一株不仅能用于生产井冈霉素，而且能提高井冈霉素A含量，降低井冈霉素B含量的黄麻链霉菌。

申请人以黄麻链霉菌(KN-11)为出发菌株，将其采用1000Gy剂量60CO-γ射线进行第一轮诱变，获得一株KN-16菌株，该菌株比出发菌株的效价(产井冈霉素A的含量)高出21％，然后再用紫外线对KN-16菌进行第二轮诱变，获得一株KN-162菌株，比KN-16的效价提高9.8％。将KN-162菌株进行再一次抗性筛选，用高纯度、杂质含量低的自身代谢物处理该菌株，杀死或抵制绝大多细胞的繁殖，选出有大量产生该代谢物的抗反馈突变株，得到1株正突变KN-1625菌株，该菌株产井冈霉素A的含量比KN-162菌株高18％，产井冈霉素B/A的含量比KN-162菌株低约37.56％。

该菌株经鉴定为黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii)，命名为KN-1625，申请人于2015年11月26日将该菌保藏于位于湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2015710。

为验证KN-1625菌生产井冈霉素的性能，申请人将KN-1625菌株投入生产并进行了两批次的中试研究，首先将KN-1625菌株进行活化，活化后的菌悬液进行二级种子培养，培养液再进入发酵罐进行发酵，放罐后用高效液相色谱法对发酵液进行检测，结果表明：发酵液中井冈霉素A的含量高达3.065％，井冈霉素B与井冈霉素A的含量比(B/A)仅为11.52％，与出发菌株(KN-11)相比，井冈霉素A含量提高了47.00％，B/A降低了37.56％，且井冈霉素产量稳定在30000μg/mL以上，比CK菌株也有所提高。试验结果还表明，KN1625菌株的遗传稳定性好，传至四代产井冈霉素水平与第一代相当。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行详细地说明。

实施例1菌株的诱变和筛选

1.利用60CO-γ射线处理菌悬液以得到突变菌株