[发明专利]一种野生红芝的抗病品种选育方法

说明书

技术领域

本发明涉及灵芝育种领域，尤其涉及一种野生红芝的抗病品种选育方法。

背景技术

我国的灵芝母种多为由日本、韩国引进的品种，经多年的反复栽培，退化 严重，人工栽培的灵芝有效成分不足野生灵芝的1/3，灵芝多糖、三萜等主要有 效成分不断缺失，且抗病害抗高温能力弱，造成产量及质量逐年下降。因此， 以我国原产野生灵芝作为母种进行抗病品种选育成为灵芝育种的当务之极。

发明内容

为了解决上述技术问题，提供一种针对我国苏南地区原生的野生红芝抗病 品种的育种方法，本发明提供以下技术方案：

一种野生红芝的抗病品种选育方法，包括以下步骤：

S1、出发菌种培育：直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱 发愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种；

S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中，并在25℃恒温箱中 培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离菌株进行小试栽培，筛 选出菌丝生长情况最好的两个菌株；选择抗病能力强的菌株作为变异原料；

S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.58-0.76伦/天的 γ射线照射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同 菌株，并分别将不同菌株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为 抗病新品种。采用γ射线照射能够诱发菌丝变异，提高保护性酶活性，诱变得 到抗病新品种，选择0.58-0.76伦/天这一较高的辐射剂量进行长期的辐射处理 是因为辐射剂量小，菌丝吸收剂量小，不足以对菌丝生长发育产生突变性的影 响，而辐射剂量过大则会对菌丝造成毁灭性的的影响，使新品种选育无法完成。

进一步的，步骤S1中选择色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细 胞提取。选择优良的母种有利于将优质的遗传基因延续到新品种。

进一步的，步骤S2中将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中， 并在32-35℃的恒温箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离 菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情况最好的两个菌株。灵芝病害主要分为 侵染性病害和非侵染性病害，绿色木霉为侵染性病害，温度过高为非侵染性病 害，同时将出发菌种置于两种病害同时发生的环境，能够使得新品种的抗病能 力更全面。而且，温度越高，绿色木霉生长速度越快，能够为出发菌种提供一 个更为严苛的病害环境，使得新品种抗病能力更强，同时，将红芝置于高温下 培养，能够使得新品种兼具抗高温的能力，在温室效应愈发显著的当代社会也 显得十分重要。

进一步的，步骤S2中将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子、青霉、拟青霉 以及曲霉孢子的PDA培养基中。灵芝侵染性病害中绿色木霉为发生频率和危害 程度最高的，但是青霉、拟青霉以及曲霉感染几率也较高，因此在培养基中同 时加入这4中孢子能够使得新品种具备多种侵染性病害的抵抗能力。

进一步的，步骤S3中γ射线照射强度为0.60-0.65伦/天。此辐射剂量下的 菌丝突变最为活跃，得到的红芝新品种抗病能力强。

本发明的有益效果在于：采用本方法培育的野生红芝新品种抗病害能力强 且全面，同时能够保留野生红芝的优良性状，产量高、有效成分高。

具体实施方式

实施例1、

一种野生红芝的抗病品种选育方法，包括以下步骤：

S1、出发菌种培育：直接从正在生长的野生红芝营养体上提取幼嫩的体细胞诱 发愈伤组织，再逐渐培养成的菌丝体，选取洁白、健壮的菌丝作为出发菌种； 本实施例中选择色泽亮丽、无病虫害、健壮的野生红芝进行体细胞提取；

S2、将出发菌种接种于含有绿色木霉孢子的PDA培养基中，将此培养基命名为 A1，并在25℃恒温箱中培养，选取生长健壮的子实体进行组织分离，并对分离 菌株进行小试栽培，筛选出菌丝生长情况最好的两个菌株；

S3、将上述两个菌株分别在栽培瓶中培养成菌丝体，并接受0.62伦/天的γ射 线照射10天，选择菌丝浓密程度高的菌株进行复壮培养，分离纯化出不同菌株， 并分别将不同菌株培养成菌丝，根据菌丝生长情况选取最优的菌株作为抗病新 品种SH-1。

实施例2、

一种野生红芝的抗病品种选育方法，包括以下步骤：