[发明专利]高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法有效

专利信息
申请号: 201510980331.0 申请日: 2015-12-23
公开(公告)号: CN105506014B 公开(公告)日: 2019-02-12
发明(设计)人: 许岗;曾红宇;陈梅 申请(专利权)人: 湖南宝利士生物技术有限公司
主分类号: C12P13/06 分类号: C12P13/06
代理公司: 长沙市融智专利事务所 43114 代理人: 魏娟
地址: 410300 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 光学 丝氨酸 及其 衍生物 生物 合成 方法
【权利要求书】:

1.高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:在反应液中,丙酮酸与醛类化合物原料在醛缩酶的催化作用下,进行反应I;反应I所得产物在甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶的催化作用下,进行反应II,反应II所得产物依次经过层析分离、脱盐、脱色、浓缩结晶、干燥处理,得到L高丝氨酸或L高丝氨酸衍生物;

所述的丙酮酸具有式1结构:

所述的醛类化合物具有式2结构:

所述的L-高丝氨酸衍生物具有式3的结构:

所述反应I所得产物具有式4结构:

其中,R为氢、烷基或芳基;

R1为氢、烷基或芳基。

2.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:

所述的醛缩酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为10000U/mol~15000U/mol;所述的甲酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为10000U/mol~15000U/mol;

所述的L-氨基酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为4000U/mol~8000U/mol。

3.根据权利要求2所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:

所述的醛缩酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为11000U/mol~13000U/mol;所述的甲酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为11000U/mol~13000U/mol;

所述的L-氨基酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为5000U/mol~7000U/mol。

4.根据权利要求1~3任一项所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶中甲酸脱氢酶与L-氨基酸脱氢酶在反应液中的活力比为1.2~3:1。

5.根据权利要求4所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶中甲酸脱氢酶与L-氨基酸脱氢酶在反应液中的活力比为1.5~2.5:1。

6.根据权利要求1~3任一项所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的L-氨基酸脱氢酶为L-亮氨酸脱氢酶、L-苯丙氨酸脱氢酶、L-缬氨酸脱氢酶、L-谷氨酸脱氢酶中的至少一种;所述的醛缩酶为唾液酸醛缩酶或脱氢泛解酸醛缩酶。

7.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的丙酮酸在反应液中的质量百分比浓度为5%~10%,所述反应液中醛类化合物与丙酮酸的摩尔比为1:0.3~0.8。

8.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应II中添加NAD+辅酶因子;所述的NAD+辅酶因子相对于丙酮酸在反应液中的加入量≤0.06g/mol。

9.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应I的条件为:pH为6.0~8.0,温度为20~40℃。

10.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应II的条件为:pH为6.0~8.0,温度为20~40℃。

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