[发明专利]高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法有效
申请号: | 201510980331.0 | 申请日: | 2015-12-23 |
公开(公告)号: | CN105506014B | 公开(公告)日: | 2019-02-12 |
发明(设计)人: | 许岗;曾红宇;陈梅 | 申请(专利权)人: | 湖南宝利士生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P13/06 | 分类号: | C12P13/06 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 魏娟 |
地址: | 410300 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 光学 丝氨酸 及其 衍生物 生物 合成 方法 | ||
1.高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:在反应液中,丙酮酸与醛类化合物原料在醛缩酶的催化作用下,进行反应I;反应I所得产物在甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶的催化作用下,进行反应II,反应II所得产物依次经过层析分离、脱盐、脱色、浓缩结晶、干燥处理,得到L高丝氨酸或L高丝氨酸衍生物;
所述的丙酮酸具有式1结构:
所述的醛类化合物具有式2结构:
所述的L-高丝氨酸衍生物具有式3的结构:
所述反应I所得产物具有式4结构:
其中,R为氢、烷基或芳基;
R1为氢、烷基或芳基。
2.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:
所述的醛缩酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为10000U/mol~15000U/mol;所述的甲酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为10000U/mol~15000U/mol;
所述的L-氨基酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为4000U/mol~8000U/mol。
3.根据权利要求2所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:
所述的醛缩酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为11000U/mol~13000U/mol;所述的甲酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为11000U/mol~13000U/mol;
所述的L-氨基酸脱氢酶相对于丙酮酸在反应液中的加入量为5000U/mol~7000U/mol。
4.根据权利要求1~3任一项所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶中甲酸脱氢酶与L-氨基酸脱氢酶在反应液中的活力比为1.2~3:1。
5.根据权利要求4所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的甲酸脱氢酶和L-氨基酸脱氢酶复合酶中甲酸脱氢酶与L-氨基酸脱氢酶在反应液中的活力比为1.5~2.5:1。
6.根据权利要求1~3任一项所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的L-氨基酸脱氢酶为L-亮氨酸脱氢酶、L-苯丙氨酸脱氢酶、L-缬氨酸脱氢酶、L-谷氨酸脱氢酶中的至少一种;所述的醛缩酶为唾液酸醛缩酶或脱氢泛解酸醛缩酶。
7.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:所述的丙酮酸在反应液中的质量百分比浓度为5%~10%,所述反应液中醛类化合物与丙酮酸的摩尔比为1:0.3~0.8。
8.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应II中添加NAD+辅酶因子;所述的NAD+辅酶因子相对于丙酮酸在反应液中的加入量≤0.06g/mol。
9.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应I的条件为:pH为6.0~8.0,温度为20~40℃。
10.根据权利要求1所述的高光学纯L-高丝氨酸及其衍生物的生物合成方法,其特征在于:反应II的条件为:pH为6.0~8.0,温度为20~40℃。
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