[发明专利]一种基于微接触剥离技术利用点面电极电场制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法

说明书

一种基于微接触剥离技术利用点面电极电场制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法，它涉及一种制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法。本发明的目的是要解决现有不能制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的问题。方法：一、清洗电极；二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗；三、制备混合磷脂干膜；四、制备三元混合磷脂干膜阵列的ITO电极；五、密闭制备装置的组装；六、相分离的巨型磷脂囊泡阵列的形成过程，得到相分离的巨型磷脂囊泡阵列。本发明制备的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为30μm～50μm。本发明可获得一种基于微接触剥离技术利用点面电极电场制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法。

技术领域

本发明涉及一种制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法。

背景技术

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质和蛋白质的微区，以液态有序相分散于细胞膜中，对生物体内的信号传导，蛋白质转运，细胞膜结构以及病原体入侵等生理过程中都起着非常重要的作用。但细胞膜中的脂筏不能用显微镜直接观察，目前主要是采用间接的方法对脂筏进行研究。由于巨型磷脂囊泡与细胞膜结构相似、与细胞尺寸相近，且便于用显微镜进行观察，三元组分巨型磷脂囊泡的相分离被广泛应用于脂筏的模拟中。目前相分离巨型磷脂囊泡阵列的制备还罕见报道。

发明内容

本发明的目的是要解决现有不能制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的问题，而提供一种基于微接触剥离技术利用点面电极电场制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法。

一种基于微接触剥离技术利用点面电极电场制备相分离的巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：

一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h～6h，再用蒸馏水进行冲洗3次～6次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；

二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；

三、制备混合磷脂干膜：将混合磷脂溶解到氯仿中，得到混合磷脂/氯仿溶液；再将混合磷脂/氯仿溶液均匀涂覆在清洗后的ITO电极的导电面上，室温下自热干燥2h～4h，得到干燥的涂有混合磷脂的ITO电极；

步骤三中所述的混合磷脂为1,2-二油酰基磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱和胆固醇的混合物；所述的混合磷脂中1,2-二油酰基磷脂酰胆碱与二硬脂酰磷脂酰胆碱质量比为1:(0.6～3)；所述的1,2-二油酰基磷脂酰胆碱与胆固醇的质量比为1:(0.4～2)；

步骤三中所述的混合磷脂/氯仿溶液中混合磷脂的质量与氯仿的体积比为(3mg～15mg):1mL；

步骤三中所述的混合磷脂/氯仿溶液的体积与清洗后的ITO电极的导电面的面积比为(3μL～10μL):1.44cm²；

四、制备三元混合磷脂干膜阵列的ITO电极：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面压印在干燥的涂有混合磷脂的ITO电极的混合磷脂干膜上10min～50min，得到三元混合磷脂干膜阵列的ITO电极；

步骤四中所述的压印时每1cm²清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.05N～0.1N；

五、密闭制备装置的组装：将三元混合磷脂干膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；