[发明专利]具有高荧光寿命的荧光指示剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种荧光指示剂，特别涉及一种具有高荧光寿命的荧光指示 剂。

背景技术

荧光指示剂是指能够受激照射产生荧光的一类物质，在现有技术中虽然 能够产生荧光的物质较多，但普通的荧光指示剂受配体和中心金属的限制， 其荧光寿命较短，一般在纳秒级别(1ns＝10^-9s)，并且，由于配体所带基团的 影响，使得其在溶解度和对抗体的可修饰范围上受到了极大地限制。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种稀土配位物荧光 指示剂，该指示剂能够对氨基酸、多肽、蛋白质、生物素、亲和素、核酸等 分子进行标记，通过激光激发荧光指示剂，检测发射出的荧光强度，可以定 量检测待测物质的浓度。

为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

一种荧光指示剂，其至少包含有以下化合物：

其中，R₁为-COOH或-CONH(CH₂)_nNH₂或 -CONH(CH₂)_nNHCO(CH₂)_mCOON(COCH₂CH₂CO)或 -CONH(CH₂)_nNHCOPh-p-NCS；

R₂选自H原子、羧酸酯、羧酸或卤素原子中的一种；

R₃选自H原子、羧酸酯、羧酸或卤素原子中的一种；

R₄选自H原子、羧酸酯、羧酸或卤素原子中的一种；

R₅选自H原子、羧酸酯、羧酸或卤素原子中的一种；

R₆选自H原子、羧酸酯、羧酸或卤素原子中的一种。

R₂～R₆基团的作用主要是调节该化合物的在不同溶剂中的溶解度和荧光 发光效率；R₁的作用是：1)延长受激后发出的荧光的寿命，使其能够达到微 秒级；2)增加荧光指示剂与抗体(或蛋白)的键合便利性，以提高荧光指示 剂的可修饰性，同时降低荧光指示剂对抗体(或蛋白)生物活性的影响；3) 调节荧光指示剂在生物试剂中的溶解度。

优选的是，所述的荧光指示剂，其中，n为正整数。

优选的是，所述的荧光指示剂，其中，m为正整数。

优选的是，所述的荧光指示剂，其中，所述羧酸酯为-COOCH₃。

优选的是，所述的荧光指示剂，其中，所述羧酸为-COOH。

本发明的有益效果是：本案所设计的荧光指示剂可被紫外光所激发，产 生的荧光强度高，stokes位移大，可高达280nm；同时该指示剂具有时间分 辨特性，激发后能长时间发出荧光，达到微秒级，可以利用此特性来消除待 测样本的生物背景荧光(生物背景荧光激发后维持时间短，在纳秒级)。

附图说明

图1为实施例1的HPLC检测结果图。

图2为实施例2的质谱图。

图3为荧光指示剂的发射光谱和激发光谱图。

图4为荧光指示剂的荧光寿命测试图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照 说明书文字能够据以实施。

实施例1

一种荧光指示剂，其至少包含有以下化合物：

它的合成方法如下：

该化合物的HPLC图见图1。

实施例2

一种荧光指示剂，其至少包含有以下化合物：

它的合成方法如下：(以n＝2为例)

该化合物的质谱图见图2。

实施例3

一种荧光指示剂，其至少包含有以下化合物：

它的合成方法如下：(以n＝2，m＝6为例)

注：DSS为双琥珀酰亚胺辛二酸酯。

实施例4