[发明专利]复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法

权利要求书

1.复合菌法提取剑麻皂素和/或海柯吉宁的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取龙舌兰属植物或其麻渣，加水，调pH至3-6，加入果胶酶和纤维素酶，搅拌反应后得到清液1；

(2)将菌种分别接种于培养液中，发酵结束后，将发酵液与清液1混匀，搅拌反应，静置，去除上层清液，将下层离心，去除上层清液，得到沉淀物1，收集此步骤所得清液高温灭菌后弃去；

(3)将沉淀物1与生石灰混匀，加入75-95％的乙醇水溶液，加热回流后，加入活性炭，回流后，离心，弃去沉淀，得到清液2；

(4)在清液2中加入强碱，搅拌溶解后，加入盐酸羟胺，加热回流后，离心得清液3和沉淀物2；以及

(5)将清液3结晶，干燥得到剑麻皂素；和/或

(6)将沉淀物2与至少85％的乙醇水溶液和0.5-1.5mol/L的盐酸水溶液混匀，回流后，重结晶，干燥得到海柯吉宁；

其中，所述菌种为黑曲霉(Aspergillus niger)和米曲霉(Aspergillus oryzae)，或者为里氏木霉(Trichorderma reesei)、米曲霉(Aspergillus oryzae)和青霉菌(Penicillium sp.)，

其中，龙舌兰属植物为剑麻、番麻、亚洲马盖麻、假菠萝麻或无刺番麻。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，龙舌兰属植物为剑麻。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，麻渣为干渣。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，龙舌兰属植物或其麻渣被粉碎成粒径为0.01-5cm的颗粒。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，龙舌兰属植物或其麻渣被粉碎成粒径为0.1-3cm的颗粒。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，龙舌兰属植物或其麻渣被粉碎成粒径为1cm的颗粒。

7.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，加水量为龙舌兰属植物或其麻渣重量的0.5-25倍。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，加水量为龙舌兰属植物或其麻渣重量的1-10倍。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，加水量为龙舌兰属植物或其麻渣重量的2-5倍。

10.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，调pH至4-5。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，调pH至4.5。

12.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，用柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲溶液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液调pH。

13.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，龙舌兰属植物或其麻渣:果胶酶:纤维素酶的重量比为1:(0.001-0.2):(0.0005-0.1)。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，龙舌兰属植物或其麻渣:果胶酶:纤维素酶的重量比为1:(0.005-0.1):(0.001-0.05)。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，龙舌兰属植物或其麻渣:果胶酶:纤维素酶的重量比为1:(0.01-0.02):(0.005-0.01)。

16.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，反应时间为1-12h。