[发明专利]与椎间盘退行性病变相关的微小RNA

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及miR-744在诊治椎间盘退行性病变中的用途。

背景技术

一系列调查表明：在西方工业社会，12％-35％的人患有下腰痛，其中10％已丧失劳动能力。美国最新统计显示，因下腰痛造成的直接医疗支出和间接损失保守估计为每年196亿美元，给社会医疗带来沉重负担。椎间盘退行性变是引起下腰痛的主要原因，它与坐骨神经痛和椎间盘突出、脱垂等疾病关系密切。

人微小核糖核酸，英文名为microRNA，是一类长约19至23个核苷酸的非编码单链小核糖核酸分子。它们在进化上高度保守，并与动物的许多正常生理活动，如生物个体发育、组织分化、细胞凋亡以及能量代谢等密切相关，同时也与许多疾病的发生及发展存在着紧密的联系。最近的研究发现慢性淋巴细胞性白血病以及Burkitt淋巴瘤中的几种微小核糖核酸的表达水平均有不同程度的下调(LawrieCH，GalS，DunlopHMetal.Detectionofelevatedlevelsoftumor-associatedmicroRNAsinserumofpatientswithdiffuselargeB-celllymphoma.BrJHaematol2008；141：672-675)；分析比较人肺癌、乳腺癌组织中的微小核糖核酸表达时，发现有若干组织特异性微小核糖核酸的表达水平相对于正常组织发生了变化(GarofaloM，QuintavalleC，DiLevaGetal.MicroRNAsignaturesofTRAILresistanceinhumannon-smallcelllungcancer.Oncogene2008)。也有研究证明微小核糖核酸影响了心肌肥厚、心衰、动脉粥样硬化等心血管疾病的发生和发展，并且与II型糖尿病等代谢性疾病有密切关联(TryndyakVP，RossSA，BelandFA，PogribnyIP.Down-regulationofthemicroRNAsmiR-34a，miR-127，andmiR-200binratliverduringhepatocarcinogenesisinducedbyamethyl-deficientdiet.MolCarcinog.2008Oct21)。这些实验结果提示微小核糖核酸表达及特异性变化与疾病发生和发展之间存在着必然联系。

由于微小核糖核酸在基因转录后的表达调控中起着超乎想象的重要作用，因此它与疾病存在以下的关联性：首先，微小核糖核酸的变化可能是病因，这是因为疾病的抑制因子以及促进因子都可能是微小核糖核酸的靶位点，当微小核糖核酸本身先发生了紊乱表达，比如本来抑制疾病促进因子的微小核糖核酸表达量降低了，或者抑制疾病抑制因子的微小核糖核酸表达量升高了，其最终结果都会导致下游一系列基因表达的变化以及某些通路的整体紊乱，进而诱发疾病发生；其次，微小核糖核酸的变化也可能是疾病的结果，这是因为当疾病发生时，会导致染色体片段的丢失、基因的突变或者染色体片段的剧烈扩增，若微小核糖核酸正好位于这一变化区段内，那么其表达量将发生极其显著的变化。

因此，理论上微小核糖核酸分子完全可以作为一类新的疾病标记物，它的特异性变化必然与疾病产生发展相关联。同时微小核糖核酸还可以作为潜在的药物作用靶点，通过抑制疾病过程中上调的微小核糖核酸或过表达下调的微小核糖核酸，将有可能极大地缓解疾病的发生和发展。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种可用于早期诊断椎间盘退行性病变的微小RNA标记物。

本发明的目的之二在于提供上述微小RNA的用途。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了一种微小RNA在制备椎间盘退行性病变诊断工具中的应用，所述微小RNA选自以下组：初始miRNA、前体miRNA、成熟miRNA；初始miRNA能在人细胞内被剪切并表达成成熟miRNA；前体miRNA能在人细胞内被剪切并表达成成熟miRNA；所述微小RNA是miR-744。

应当知道，本发明的微小RNA包括组成型核酸分子的功能等同物，即变体，其显示完整微小RNA核酸分子相同的功能，尽管它们通过核苷酸残基的缺失、置换或者插入而突变。

本领域人员应该了解，为了保证微小RNA的稳定性，可以在微小RNA的一端或者两端增加保护性碱基，如TT，也可对微小RNA碱基进行修饰，但是上述修饰不影响微小RNA的功能。因此，本领域技术人员熟知，在不影响miR-744功能的条件下，对miR-744进行碱基修饰或者在两端增加碱基获得的序列同样包含在本发明的保护范围之内。