[发明专利]一种毛叶铁线蕨的组培繁殖方法

权利要求书

1.一种毛叶铁线蕨的组培繁殖方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1、收集毛叶铁线蕨孢子，进行消毒；

S2、毛叶铁线蕨孢子用无菌水配成悬浮液，加入到孢子萌发培养基中，培养25～35d，孢子萌发并发育成片状原叶体；所述孢子萌发培养基每升含6～7g琼脂、20～25g蔗糖，其余为MS或Knop培养基，pH为5.8～6.0；

S3、将片状原叶体转接至增殖培养基中培养25～35d，再转入孢子体诱导培养基中培养30～40d，形成幼孢子体；所述增殖培养基每升含0.2～1mg 6-BA、0.1～0.5mg NAA、6～7g琼脂、20～25g蔗糖，其余为MS培养基，pH为5.8～6.0；所述孢子体诱导培养基每升含6～7g琼脂、20～25g蔗糖，其余为MS培养基，pH为5.8～6.0；

S4、将幼孢子体团分离成单株幼孢子体或具4～5株幼孢子体的小丛，与多菌灵消毒液混合，然后将混合液均匀倒入土壤基质中培养。

2.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤S1的消毒具体为：将毛叶铁线蕨孢子用滤纸包好，在无菌水里浸泡3～5min，再在升汞溶液中浸泡3～4min，最后用无菌水漂洗干净。

3.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤S2、S3的培养条件都是：温度25～30℃，光照强度2000～2500lx，光照时间12h/d。

4.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于，所述土壤基质由泥炭土、珍珠岩和蛭石按体积比1：1：1混合得到。

5.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤S4的混合液为每200mL浓度为0.1wt％的多菌灵消毒溶液中含2块幼孢子体团的分离物。