[发明专利]山蜡梅叶片在制备抑制畸胎瘤细胞P19细胞增殖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种山蜡梅叶片在制备抑制畸胎瘤细胞P19 细胞增殖药物中的应用及山蜡梅叶片的制备方法。

背景技术

山蜡梅叶片标准号WS-11310(ZD-1310)-2002，记载于国家中成药标准汇编内科内 科肺系（一）分册。由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，具有辛凉解表，清热解毒的功效。用于 风热感冒，发热，恶寒，咽痛。

现有技术中，尚未有山蜡梅叶片在在制备抑制小鼠畸胎瘤细胞P19细胞增殖药物 中的应用的报道，也未见有山蜡梅叶片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而水煎煮、水 蒸气蒸馏法提取挥发油的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用， 严重影响了本品在临床上应用。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种山蜡梅叶片在制备抑制畸胎瘤细胞P19细 胞增殖药物中的应用。

本发明的另一个目的在于提供一种山蜡梅叶片的制备方法。

本发明的目的是通过如下的方案实现的：

山蜡梅叶片在制备抑制畸胎瘤细胞P19细胞增殖药物中的应用，所述山蜡梅叶片由山 蜡梅叶1500g作为原料药制成，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶， 加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%， 萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生药·min，萃取时间700-800min，得超 临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重 0.35g。

优选的，上述的山蜡梅叶片在制备抑制畸胎瘤细胞P19细胞增殖药物中的应用，所 述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇 作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40℃，CO₂流量 2ml/g生药·min，萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制 颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。

现有技术中，山蜡梅叶片口服，一次6～7片，一日3次。山蜡梅叶片服药量大。采用 本发明方法制备成的山蜡梅叶片每片重0.35g，每次仅需3片，一日服用3次。在具有更多活 性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。

试验一、不同方法制备的山蜡梅叶片中槲皮素和山柰素含量的比较

l、仪器及试药本发明山蜡梅叶片：按实施例1方法制备，使用1500g原料药，经提取制成 500片，每片重0.35g。原山蜡梅叶片，按照WS-11310(ZD-1310)-2002标准方法制备。 Agilent1200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；槲皮素和山柰素对照品（中国 药品生物制品检定所）。

2、方法

照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.5％磷 酸溶液（45∶55）为流动相；检测波长为365nm。理论板数分别按槲皮素、山柰素峰计算均应不 低于1500。

对照品溶液的制备精密称取槲皮素、山柰素对照品适量，分别加甲醇制成每1ml 含6μg、8μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本发明山蜡梅叶片10片，精密称定，研细，取0.60g，精密称 定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml），每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加甲醇适量洗涤，滤 过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至3～4，加醋酸乙酯振 摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中， 加甲醇至刻度，摇匀，即得。

对照产品供试品溶液的制备取对照的山蜡梅叶片20片，精密称定，研细，取 1.2g，精密称定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml），每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加甲醇 适量洗涤，滤过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至3～4， 加醋酸乙酯振摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移 至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。