[发明专利]15-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于中医药研究技术领域，具体涉及一种15-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法。

背景技术

雷公藤（TripterygiumwillfordiiHook.f）系卫矛科雷公藤属植物，以全根或去皮根木质部入药。雷公藤具有活血化瘀、清热解毒、消肿散结、祛风除湿、杀虫止血的作用，临床用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肾炎、强制性脊柱炎等，但其有大毒，且其临床有效剂量与中毒剂量相近，这使雷公藤的全药应用至今未能得到广泛推广。

为了充分发挥雷公藤的药用功效，国内外学者已从雷公藤属植物中分离出几十种化学成分，主要有二萜、三萜、倍半萜、生物碱、苷类、糖类和醇类等。其中，雷公藤内酯酮（Triptonide），又叫雷公藤羰内酯、雷公藤酮，是从雷公藤中分离得到的二萜类化合物，其具有抗炎、免疫抑制、抗新生血管等多种功效，是雷公藤药物活性成分的一个重要的研究方向。

发明内容

本发明的目的在于提供一种15-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，所得15-羟基雷公藤内酯酮的纯度高，可为雷公藤内酯酮的化学结构、药理作用等研究提供物质基础。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种15-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其包括以下步骤：

1）将雷公藤粉碎，过20目筛，加其重量5倍体积的乙醇浸泡20-24h后，在雷公藤中加入其重量30-35倍体积的乙醇作为渗滤液，每500mL收集一次，将其浓缩至干，加1mL三氯甲烷溶解后采用TLC对其进行定性检测，直至检测为阴性时停止渗漉，然后将渗漉液合并、浓缩，得乙醇浓缩液；

2）按体积比1:1.5将所得乙醇浓缩液加乙酸乙酯萃取5-6次，每次萃取过程中需振摇20次，每次萃取后将收集的乙酸乙酯溶液浓缩，采用TLC对其进行定性检测，直至检测为阴性时停止萃取然后将萃取得到的乙酸乙酯溶液合并、浓缩，经微波干燥制得干粉；

3）将所得干粉加等体积乙酸乙酯溶解后，按干粉与硅胶的重量比为1:80进行湿法上柱，采用硅胶柱层析进行分离，将乙酸乙酯与石油醚按体积比2.2:2.8混合作为洗脱剂进行洗脱，每500mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC对浓缩液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂后微波干燥，得粗提干粉；

4）将所得粗提干粉加等体积三氯甲烷溶解后，按粗提干粉与硅胶的重量比为1:120进行湿法上柱，采用硅胶柱层析进行分离，将三氯甲烷与甲醇混合作为洗脱剂，按混合比例99:1、98:2、97:3、96:4进行梯度洗脱，每200mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC对浓缩液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂至干，得精提物；

5）将所得精提物加二氯甲烷溶解后，在二氯甲烷和乙醚的混合液中重结晶3-5次，得无色针状结晶，即为所述15-羟基雷公藤内酯酮。

步骤1）所述雷公藤包含雷公藤植株的根心、根皮、茎和叶中的任意一种或几种。

步骤2）所述微波干燥的功率为500W，频率为2450MHz，温度为40℃，干燥时间为30-40min。

步骤3）所述微波干燥的功率为500W，频率为2450MHz，温度为40℃，干燥时间为10min。

所得15-羟基雷公藤内酯酮的结构式为：

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