[发明专利]一种废纸浆制备细菌纤维素复合医用敷料的方法

权利要求书

1.一种废纸浆制备细菌纤维素复合医用敷料的方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）将200～300g硫酸盐纸浆废料和400～500mLpH为7～8的柠檬酸缓冲溶液混合后倒入酶解罐中，向酶解罐中加入3～5g纤维素酶，用搅拌棒搅拌均匀后移入恒温箱中，在40～50℃下酶解36～48h，将酶解物放入高速离心机，在4～6℃下以4000～5000g的离心力离心10～15min，分离得到木浆酶解上清液，备用；

（2）称取3～5g葡萄糖、1～2g酵母粉、0.5～1g蛋白胨和5～10mL蒸馏水放入灭菌后的培养皿中，用玻璃棒搅拌均匀，通过接种环挑取1～2环木醋杆菌菌株接种于培养皿中，于30～40℃下培养12～15h，制得木醋杆菌复壮种子液；

（3）取100～200mL木浆酶解上清液，向里加入1～3g酵母粉和2～3g胰蛋白胨，用浓度为0.02mol/L的硫酸溶液调节pH至5～6，在105～110℃下灭菌20～30min，待其冷却后以10～15%的接种量接入上述制得的复壮种子液，放入恒温培养箱，在30～40℃下培养7～9天；

（4）培养结束后，用镊子取出培养皿和空气交界面形成的凝胶状细菌纤维素，用蒸馏水反复冲洗3～5次后放入水浴锅中，在80～90℃下水浴30～60min，去除残余菌体，再用去离子水冲洗至中性，得细菌纤维素；

（5）将碎蚕茧和质量浓度为5%的碳酸钠溶液按固液比为1:50进行混合，在95～100℃下水浴脱胶30～40min，再放入氯化钙、乙醇和水的三元组分溶液中浸泡，于70～80℃下水浴直至丝素蛋白完全溶解；

（6）将溶解的丝素蛋白溶液静置过夜，装入透析袋中，以双蒸水为透析液进行透析60～70h，每2～3h更换一次透析液，透析结束后，将透析袋中溶液以6000～7000r/min的转速离心处理，分离得到上清液；

（7）将细菌纤维素和上述得到的上清液按固液比为1:2进行混合后，倒入聚四氟乙烯模具中，进行冷冻干燥得复合膜，将得到的复合膜放入烘箱，于50～60℃下干燥1～2h，再将其放入圆形容器中，加入适量浓度为0.1mol/L的氯化钙溶液将复合膜浸没，常温下浸泡2～3h后再加入等体积的0.2mol/L的磷酸二氢钠溶液，继续常温浸泡2～3天；

（8）将浸泡后的复合膜用双蒸水和无水乙醇反复冲洗3～5次后，自然晾干，与4～6℃下保存，备用，制得的即为一种废纸浆制备细菌纤维素复合医用敷料。

2.根据权利要求1所述的一种废纸浆制备细菌纤维素复合医用敷料的制备方法，其特征在于：所述的木醋杆菌编号为ATCC23770。

3.根据权利要求1所述的一种废纸浆制备细菌纤维素复合医用敷料的制备方法，其特征在于：所述的氯化钙、乙醇和水的三元组分溶液是由氯化钙、无水乙醇和蒸馏水按质量比为2:5:10复配得到。