[发明专利]垂丝海棠提取物和活性化合物、制备方法及应用

说明书

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及了一种包括垂丝海棠花总浸膏、40%甲醇部位浸膏、60%甲醇部位浸膏、甲醇部位浸膏的垂丝海棠花提取物，以及从垂丝海棠花中分离得到的活性化合物宝藿苷Ⅱ（1）、山奈酚‑3‑O‑α‑L‑呋喃阿拉伯糖苷（2）、根皮素‑4'‑O‑葡萄糖苷（3）、山奈酚‑3‑O‑α‑L‑鼠李糖苷（4）的制备和运用。实验证明，垂丝海棠花各提取物和各活性化合物均具有抗凝血作用，可以单独或组合用于制备抗凝血剂。

技术领域

本发明属于医药和/或保健品技术领域，具体涉及一种垂丝海棠提取物和从垂丝海棠花中分离得到的活性化合物、制备方法，以及其在抗凝血方面的新用途。

背景技术

垂丝海棠（Malus halliana Koehne）是蔷薇科苹果属植物。垂丝海棠，气微，味微苦、涩，性平，归肝经，有调经和血的功效，主要用于治疗血崩。垂丝海棠与同科的贴梗海棠（C. speciosa）、西府海棠（M. micromalus）和木瓜海棠（C. cathayensis）并称“海棠四品”。查阅文献发现：垂丝海棠具有保肝、抗氧化、体外抑制α-葡萄糖苷酶活性，而且垂丝海棠花、叶和果实中都有一定的活性成分，药用价值较高。但对垂丝海棠的研究主要集中在园林美化、栽培繁育、保健饮料、生物活性方面，化学成分仅见脂溶性成分的报道。

血液凝固简称凝血，是在内源性或（和）外源性凝血途径下产生凝血酶原激活物，凝血酶原激活物在凝血因子的作用下产生凝血酶，最后凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血液由溶胶状态转变为凝胶状态。凝血过程通常分为：①内源性凝血途径；②外源性凝血途径；③共同凝血途径。外源性凝血途径是从组织因子暴露于血液而启动，到因子X被激活的过程；临床上以凝血酶原时间（PT）测定来反映外源性凝血途径的状况。内源性凝血途径是指从因子XII激活，到因子X激活的过程；临床上以活化部分凝血活酶时间（APTT）来反映体内内源性凝血途径的状况。从因子X被激活至纤维蛋白形成，是内、外源共同凝血途径；主要包括凝血酶生成和纤维蛋白形成两个阶段。

血栓形成是许多疾病如心肌梗死、缺血性卒死、深静脉血栓等的基本病理过程，它严重地危害着人类的健康，它的形成与血小板的聚集、粘附，内源性和外源性凝血系统以及纤维蛋白的形成密切相关。根据世界卫生组织的调查报告，由于动脉粥样硬化导致的血栓疾病引起的死亡已经排到了第一位。动脉血栓是由于动脉粥样硬化，斑块不稳定发生了斑块的破裂，使血液里的血小板发生聚集，激活了体内的凝血系统，最后导致血栓形成。一旦堵塞以后就会发生组织的缺血和坏死，产生严重的后果。在动脉血栓性疾病的急性或特殊状态下，需要辅助使用抗凝血药物，才能达到更好的抗血栓效果。

目前，尚无垂丝海棠花提取物和化合物宝藿苷Ⅱ、山奈酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、根皮素-4'-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷对家兔体外血浆凝血四项影响的报道。本发明通过测定垂丝海棠花提取物和化合物对凝血四项的影响，考察其体外抗凝血作用。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种垂丝海棠提取物和从垂丝海棠花中分离得到的活性化合物、制备方法，以及其在制备抗凝血药物方面的新用途。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种垂丝海棠提取物的制备方法，其以垂丝海棠花为原料，将阴干的垂丝海棠花用70%乙醇浸渍提取2－4次，每次2－4 d，提取液浓缩得到垂丝海棠花总浸膏；将垂丝海棠花总浸膏用甲醇溶解，D-101型大孔树脂拌样、装柱，依次用水、20%甲醇、40%甲醇、60%甲醇、甲醇梯度洗脱，每个浓度梯度洗脱5个柱体积，每个柱体积2000 mL，浓缩，分别得到水部位浸膏、20%甲醇部位浸膏、40%甲醇部位浸膏、60%甲醇部位浸膏、甲醇部位浸膏。垂丝海棠提取物即为垂丝海棠花总浸膏、40%甲醇部位浸膏、60%甲醇部位浸膏和甲醇部位浸膏中的一种或两种以上的混合物。